产品概述
小鼠Adipsin/Factor D ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆或其他生物液体中Adipsin/Factor D含量的酶联免疫吸附测定试剂盒。Adipsin(又称补体因子D)是一种主要由脂肪细胞分泌的丝氨酸蛋白酶，在补体替代途径中起重要作用。
产品名称 | 小鼠Adipsin/FactorDelisa试剂盒 | 英文名称 | Mouse Adipsin/FactorD ELISA Kit |
分类 | Mouse/小鼠Elisa试剂盒 | 检测范围 |
|
灵敏度 |
| 货号 | PM33663 |
产品信息
规格: 96孔板
检测范围: 0.156-10 ng/mL
灵敏度:<0.078 ng/mL
样本类型: 血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆
保存条件: 2-8°C保存，有效期12个月
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。将抗小鼠Adipsin抗体预包被于酶标板上，加入标准品或样本后，再加入生物素标记的抗小鼠Adipsin抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物。随后加入链霉亲和素-HRP，通过TMB底物显色，颜色的深浅与样本中小鼠Adipsin的浓度成正比。
试剂盒组成
预包被酶标板: 96孔(8孔×12条)
小鼠Adipsin标准品: 6管(浓度分别为10、5、2.5、1.25、0.625、0.312 ng/mL)
样本稀释液: 1瓶(20mL)
生物素标记抗体: 1瓶(120μL)
链霉亲和素-HRP: 1瓶(120μL)
洗涤缓冲液(20×): 1瓶(25mL)
TMB底物溶液: 1瓶(10mL)
终止液: 1瓶(10mL)
封板膜: 4张
说明书: 1份
样本收集与处理
血清: 室温血液自然凝固10-20分钟，2000-3000rpm离心20分钟取上清
血浆: EDTA或肝素抗凝，2000-3000rpm离心20分钟取上清
细胞培养上清: 2000rpm离心20分钟去除颗粒物
组织匀浆: 用PBS(pH7.2-7.4)制备组织匀浆，2000rpm离心20分钟取上清
样本应分装保存于-20°C或-80°C，避免反复冻融。
操作步骤
准备: 将试剂盒平衡至室温(20-25°C)，配制1×洗涤缓冲液
加样: 分别加入标准品和样本100μL至相应孔中，空白孔加样本稀释液
孵育: 37°C孵育90分钟
洗涤: 弃去液体，每孔加洗涤缓冲液350μL，静置1分钟后弃去，重复4次
加生物素标记抗体: 每孔加100μL，37°C孵育60分钟
洗涤: 同步骤4
加链霉亲和素-HRP: 每孔加100μL，37°C孵育30分钟
洗涤: 同步骤4
显色: 每孔加90μL TMB底物溶液，37°C避光显色15-30分钟
终止: 每孔加50μL终止液
检测: 450nm波长测定各孔OD值(建议在15分钟内完成)
结果计算
计算标准品和样本的平均OD值
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线
根据标准曲线计算样本浓度
若样本被稀释，需乘以稀释倍数
注意事项
不同批号试剂盒组分不可混用
避免反复冻融标准品
严格按照说明书操作，控制反应时间和温度
TMB底物溶液应避免接触金属器械
终止液为酸性溶液，避免接触皮肤和眼睛
实验废弃物应按生物危险品处理
技术参数
精密度: 批内CV<10%，批间CV<15%
回收率: 85-115%
特异性: 不与小鼠其他补体因子交叉反应
稳定性: 未开封试剂盒2-8°C保存12个月有效
应用领域
本试剂盒可用于:
肥胖和代谢综合征研究
补体系统相关疾病研究
脂肪细胞功能研究
药物开发和药效评价
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关键字： 小鼠;Adipsin/FactorD;ELISA试剂盒;