产品名称
小鼠MIP-1β/CCL4elisa试剂盒
英文名称
Mouse MIP-1β/CCL4 ELISA Kit
分类
Mouse/小鼠Elisa试剂盒
检测范围
灵敏度
货号
PM33681
规格:96T/48T
保存条件:2-8℃避光保存,避免反复冻融
保质期:6个月
检测原理
采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)。将抗小鼠MIP-1β/CCL4单克隆抗体预包被于微孔板中,加入样本或标准品后,生物素标记的检测抗体与样本中的MIP-1β/CCL4结合,形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入HRP标记的链霉亲和素及TMB底物显色,通过450nm波长测定吸光度(OD值),标准曲线定量计算浓度。
主要组分
预包被微孔板
MIP-1β/CCL4标准品(冻干粉,需复溶)
生物素标记检测抗体
HRP标记链霉亲和素
TMB显色液、终止液
洗涤缓冲液(20×浓缩液)
样本要求
适用样本:小鼠血清、血浆、细胞培养上清液
样本处理:避免溶血或反复冻融,离心去除颗粒物,-20℃保存(长期需-80℃)。
操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释至1-1000 pg/mL。
加样:每孔加样本或标准品100μL,37℃孵育90分钟。
洗涤:弃液后加洗涤液洗板5次。
加检测抗体:每孔加生物素标记抗体100μL,37℃孵育60分钟。
加酶结合物:每孔加HRP标记链霉亲和素100μL,37℃避光孵育30分钟。
显色:加TMB底物90μL,避光反应15-30分钟(显蓝色梯度)。
终止:加终止液50μL,颜色转为黄色。
检测:450nm酶标仪读数(参考波长630nm)。
注意事项
试剂使用前平衡至室温,避免交叉污染。
显色时间需根据标准品梯度调整,避免过度反应。
实验废弃液需按生物危害处理。
本试剂盒仅限科研使用,不可用于临床诊断。
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