3,3',5,5'- 四甲基联苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine,简称 TMB)是一种重要的芳香族联苯胺类化合物,化学式为 C₁₆H₂₀N₂,分子量 240.34。常温下呈白色至淡黄色结晶粉末,无明显异味,熔点 168-171℃,难溶于水,易溶于乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯等有机溶剂,在酸性条件下稳定性较好。
工业与实验室中,常用对甲基苯胺偶联还原法制备:先将对甲基苯胺在酸性条件下与亚硝酸钠进行重氮化反应,生成重氮盐,再与对甲基苯胺发生偶联反应得到偶氮化合物,最后经还原反应得到 TMB,通过重结晶可提纯至纯度≥99%。
其核心应用集中在生化检测与分析领域:作为过氧化物酶的显色底物,广泛用于 ELISA(酶联免疫吸附试验)、免疫组化、Western Blot 等实验,反应后生成蓝色产物,便于定性与定量分析;也用于制备感光材料、有机染料中间体。
安全方面,该物质具有潜在毒性,避免吸入粉尘与皮肤直接接触,操作时需佩戴防尘口罩、手套及护目镜,储存需置于阴凉干燥、通风避光处,远离强氧化剂与酸性物质。
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