人子宫肌瘤组织源细胞
产品信息
| 产品名称 | 人子宫肌瘤组织源细胞 |
| 组织来源 | 子宫肌瘤组织 |
| 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
| 细胞简介 | 人子宫肌瘤组织源细胞分离自子宫肌瘤组织；子宫肌瘤是女性生殖器官中最常见的一种良性肿瘤，也是人体中最常见的肿瘤之一，又称为纤维肌瘤、子宫纤维瘤。由于子宫肌瘤主要是由子宫平滑肌细胞增生而成，其中有少量纤维结缔组织作为一种支持组织而存在，故称为子宫平滑肌瘤较为确切。简称子宫肌瘤。有关子宫肌瘤的病因迄今仍不十分清楚，可能涉及到正常肌层的细胞突变、性激素及局部生长因子间的较为复杂的相互作用。根据大量临床观察和实验结果表明子宫肌瘤是一种激素依赖性肿瘤。雌激素是促使肌瘤生长的主要因素，还有学者认为生长激素（GH）与肌瘤生长亦有关，GH能协同雌激素促进有丝分裂而促进肌瘤生长，并推测人胎盘催乳素（HPL）也能协同雌激素促有丝分裂作用，认为妊娠期子宫肌瘤生长加速除与妊娠期高激素环境有关外，可能HPL也参加了作用。此外卵巢功能、激素代谢均受高级神经中枢的控制调节，故神经中枢活动对肌瘤的发病也可能起重要作用。因子宫肌瘤多见于育龄、丧偶及性生活不协调的妇女。长期性生活失调而引起盆腔慢性充血也可能是诱发子宫肌瘤的原因之一。总之，子宫肌瘤的发生发展可能是多因素共同作用的结果。子宫肌瘤通常含有过多的细胞外介质，其中主要含有成纤维细胞及其产生的胶原蛋白I型和III型等，肌瘤细胞与成纤维细胞以及各种生长因子发生相互作用，为肌瘤形成和生长提供了适宜的微环境。目前分子生物学研究认为，子宫肌瘤是由单克隆平滑肌细胞增殖而成，多发性子宫肌瘤是由不同克隆细胞形成的。是否上述所述因素在不同克隆形成中起到不同的作用尚不清楚。 |
| 方法简介 | 钰博实验室分离的癌组织源细胞采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。 |
| 质量检测 | 钰博实验室分离的人子宫肌瘤组织源细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
| 培养信息 | 自备试剂：0.25%胰蛋白酶/ ;PBS/ ;完全培养基：人子宫肌瘤组织源细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等) 换液频率：每2-3天换液一次生长特性：贴壁细胞形态：梭形、多角形传代比例：1:2传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态最佳消化液：0.25%胰蛋白酶人子宫肌瘤组织源细胞体外培养周期有限；建议使用钰博配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。 |
原代细胞传代方法：
一、贴壁细胞的消化法传代
1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。
2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。
3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。
4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中继续培养。第二天观察贴壁生长情况。
二、悬浮细胞的传代
1、直接传代
1）让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后，将上清吸掉1/2-2/3。
2）用吸管吹打形成细胞悬液后，分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。
2、离心法传代
1）将细胞连同培养液一并转移到离心管内，离心800-1000rpm，5分钟。
2）去除上清，加新的培养液一离心管内，用吸管吹打使之形成细胞悬液。
3）将细胞悬液分别接种到另外两到三个培养瓶中，置37℃培养箱中培养。
原代细胞培养中的6个常见错误
错误＃1：一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间
纠正＃1：原代细胞对解冻过程非常敏感，因此将小瓶置于37℃水浴中，保持并轻轻旋转直到内容物刚刚解冻是很重要的。然后应立即从水浴中取出小瓶，并转移到无菌操作台。确保您的培养瓶在解冻前已经准备就绪，以便可以立即用于接种细胞，并置于培养箱中。
错误＃2：解冻小瓶后直接离心原代细胞
纠正＃2：我们不建议在解冻后离心细胞，因为离心程序比少量的DMSO残留更有害。记住，在恢复原代细胞后的第二天更换培养基以去除任何残留的DMSO。
错误＃3：允许原代细胞变得过于融合
纠正＃3：当生长至100％汇合时，原代细胞可以变得衰老。记住，原代细胞不是100％纯，因此重要的是尽量减少污染细胞的生长。我们建议在细胞达到90-95％融合时，对原代细胞进行传代培养。
错误＃4：传代原代细胞时过度胰蛋白酶消化
纠正＃4：当细胞传代时，使用低浓度的胰蛋白酶并在显微镜下密切监测细胞。此外，记得在胰蛋白酶消化后完全中和细胞中的胰酶，因为任何活性的胰蛋白酶都将损伤细胞。我们特别推荐专门为原代细胞配制的胰蛋白酶中和溶液，但也可以使用10％血清或大豆胰蛋白酶抑制剂。
错误＃5：原代细胞可以很容易地重新冻存
纠正＃5：通常我们不推荐重新冻存原代细胞，因为这可以促进细胞衰老和/或导致功能变化。原代细胞非常敏感，重新冻结可能导致细胞死亡或损伤。
错误6：原代细胞可以无限的增殖
纠正＃6：与细胞系不同，原代细胞具有有限的扩增能力。我们建议尽早使用原代细胞进行实验以防止遗传漂移。此外，如果你正在使用一个增值困难的细胞类型，你应该密切监测细胞形态，因为少量混杂的细胞（如成纤维细胞）可能随着时间的推移，大量生长从而成为主要细胞。
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