作用原理:CFDASE 本身是一种可穿透细胞膜的非荧光性化合物。当它进入活细胞后,胞内的酯酶会将其水解,脱去乙酸盐基团,生成具有高度荧光性的 5 - 羧基荧光素(CF)。CF 分子上的琥珀酰亚胺酯基团能够与细胞内蛋白质的氨基发生共价结合,使得 CF 保留在细胞内。在细胞进行分裂时,荧光 CF 分子会平均分配到子代细胞中,荧光强度随分裂代次呈等比递减。
荧光特性:CFDASE 标记细胞呈绿色荧光,检测时的激发波长通常选择 488nm,发射波长为 518nm,兼容常见的荧光检测设备,如流式细胞仪、荧光显微镜等。
应用场景:CFDASE 最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞、NK 细胞、造血祖细胞等多种细胞的增殖检测。在体外实验中,可用于免疫应答研究、药物筛选、干细胞增殖动力学分析等;在体内实验中,可用于细胞移植后的迁移与定植追踪,如通过活体成像及组织切片免疫荧光染色,观察干细胞在体内的分布、增殖及分化情况。
优势特点:CFDASE 标记非分裂细胞的荧光稳定,可持续数月,非常适合细胞群落分析。其荧光均一性优于 PKH26,分裂后子代细胞荧光分配均衡,且能检测多达八次甚至更多细胞分裂,为研究细胞增殖过程提供了更精准、更持久的追踪手段
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