转基因水稻品系LLRICE62检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
简介：
产品名称 | 转基因水稻品系LLRICE62检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P681 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、 概述：
转基因水稻品系LLRICE62是由公司研发的一种耐除草剂（草铵膦）水稻。为了对其进行精准、高效的鉴定和监管，基于实时荧光定量PCR技术的检测试剂盒成为了权威的检测方法。该方法能够特异性地检测出LLRICE62品系中的独特DNA序列。
二、 检测目标：
本试剂盒专门用于定性检测样品中是否含有转基因水稻LLRICE62的特定DNA序列。它通过扩增和检测LLRICE62品系中特有的基因构建元件或基因组边界序列，来实现对该品系的特异性鉴定。
三、 检测原理（PCR-荧光探针法）：
该方法是实时荧光定量PCR技术的具体应用，原理如下：
DNA提取：从水稻样品（谷粒、米粉、秸秆等）中提取总DNA。
PCR扩增：在PCR反应体系中，包含：
特异性引物：一对寡核苷酸引物，能精准识别并结合到LLRICE62特有序列的两侧。
荧光标记探针：一条特异的TaqMan探针，其两端分别标记了一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。该探针能与两条引物之间的目标序列互补结合。
荧光信号释放：在PCR延伸阶段，DNA聚合酶在合成新链的同时，会利用其5'→3'外切核酸酶活性将结合的探针水解切割。
信号检测：探针被水解后，报告基团与淬灭基团分离，报告基团发出荧光。每完成一次扩增，就释放一个荧光信号。
实时监控与结果判定：实时荧光PCR仪在每一个循环结束后检测荧光信号的强度。
阳性结果：如果样品中含有LLRICE62的DNA，荧光信号会随PCR循环数的增加而指数级累积，形成一条清晰的扩增曲线。仪器通过Ct值来客观判定阳性。
阴性结果：如果样品中不含有目标序列，则无法进行特异性扩增，不会观察到荧光信号的显著增长。
四、 试剂盒典型组成：
一个完整的试剂盒通常包含：
PCR预混液：包含热启动DNA聚合酶、dNTPs、MgCl?和优化缓冲液。
引物探针混合液：针对LLRICE62品系特异性序列设计的引物和荧光标记探针（通常报告基团为FAM或VIC）。
阳性对照：含有LLRICE62目标序列的质粒DNA或基因组DNA，用于验证整个实验体系的有效性。
阴性对照：不含模板DNA的溶液（如无菌超纯水），用于监测是否存在污染。
内参检测系统：（关键组分） 用于检测样品DNA质量及PCR抑制物。通常针对水稻的内源基因（如水稻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因或肌动蛋白基因），并使用不同颜色的荧光染料标记（如HEX/VIC），与目标检测通道区分开。
五、 操作流程详解说明：
样品制备与DNA提取：从待测水稻样品中提取高质量、可扩增的DNA。
反应体系配制：在无菌区，按说明书将预混液、引物探针 mix、模板DNA和无菌水混合。
PCR扩增与荧光检测：将反应管置于实时荧光PCR仪中，运行预设的程序（通常为：预变性 → 40-45个循环的【变性-退火/延伸】）。
结果分析：
检查阴性对照：应无扩增曲线。
检查阳性对照：应有典型的扩增曲线，且Ct值在预期范围内。
检查内参基因：所有样品的内部对照均应正常扩增，表明DNA提取合格且无抑制物。
最后判断待测样品：在内部对照正常的前提下，若FAM通道出现特异性扩增曲线，则判定为LLRICE62阳性；否则为阴性。
公司正在出售的产品：
富含半胱氨酸蛋白结合蛋白抗体 | 寡核苷酸探针非同位素HRP－DAB显色法DNA斑点杂交完全试剂盒 |
中间丝相关蛋白抗体 | 冰冻切片组织PAR-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 | RHODAMINE 110蛋白标记试剂盒 |
DNA 修复蛋白补充 XP-A 细胞抗体 | 磷酸化周期素依赖性激酶6抗体 |
细菌a-（a-AMYLASE）活性比色法定量检测试剂盒 | 成骨细胞特异性因子2抗体 |
体液肌酸激酶同工酶肌肉型（CK-MM）活性比色法定量检测试剂盒 | 嗅觉受体8H3抗体 |
植物脯（proline）含量比色法定量检测试剂盒 | 4号染色体开放阅读框28抗体 |
组织超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 | 空泡分选蛋白18抗体 |
细胞络磷酸酶（TP）活性比色法定量检测试剂盒 | Src原癌基因抗体 |
植物羟赖（HYL）含量比色法定量检测试剂盒 | G蛋白结合蛋白RAB相互作用蛋白4抗体 |
化妆品甘素（dulcin）含量薄层色谱法定性检测试剂盒 | 转基因水稻品系LLRICE62检测试剂盒（PCR-荧光探针法）石蜡切片组织ER BETA 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
磷酸化肿瘤抑制基因P53重组兔单克隆抗体 | DH10B细菌 |
环指蛋白36抗体 | OSR1/OSR2蛋白抗体 |
六、 技术特点与优势：
高特异性：通过双重特异性（引物+探针）识别，能准确区分LLRICE62与其他转基因水稻品系（如Bt63、TT51-1等）或非转基因水稻。
高灵敏度：可检测出极低含量的转基因成分，适用于微量样品的检测。
闭管检测，防污染：整个检测过程无需开盖，有效避免了扩增产物的气溶胶污染。
自动化与高通量：适合同时对大量样品进行快速检测，效率高。
结果客观定量化：以Ct值为判定依据，结果可靠，重复性好。
七、 主要应用场景：
进出口检验检疫：确保进口水稻、大米及其制品符合中国及目的国的转基因生物安全管理法规。
种子纯度与真实性鉴定：防止未经授权的LLRICE62种子流入市场，保护非转基因水稻生产。
食品安全与标识监管：为市场监管部门提供技术支撑，确保标注“非转基因”的产品符合标准，保障消费者权益。
科学研究与环境监测：用于转基因水稻的追溯研究、基因流监测等生态安全评估工作。
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