转基因大豆品系MON87708检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
简介：
转基因大豆品系MON87708是由公司研发的一种具有特定性状（如抗虫、抗草甘膦复合性状）的大豆。为了对其进行精准标识和严格监管，基于实时荧光定量PCR（qPCR） 技术的检测试剂盒成为了国际公认的权威方法。该试剂盒能够特异、灵敏地鉴定出MON87708品系。
产品名称 | 转基因大豆品系MON87708检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P693 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
二、 检测目标：
本试剂盒专门用于定性检测样品中是否含有转基因大豆MON87708的品系特异性DNA序列。
核心检测靶标：它不针对普通的基因元件，而是精准检测外源基因插入大豆基因组后形成的独特边界序列。该序列是MON87708独一无二的“身份证”，从而可以将其与其他转基因大豆品系（如MON87705、A2704-12等）或非转基因大豆明确区分开来。
三、 检测原理（PCR-荧光探针法）：
该方法基于经典的TaqMan探针技术，原理如下：
DNA提取：从大豆样品（豆粒、豆粕、豆油加工品等）中提取总DNA。
特异性扩增：在PCR反应体系中，包含：
特异性引物：一对根据MON87708边界序列设计的寡核苷酸引物，确保扩增的专一性。
荧光信号产生与检测：
在PCR循环的退火/延伸阶段，DNA聚合酶利用其 5'→3' 外切核酸酶活性，水解切割与模板结合的探针。
探针被切割后，报告基团与淬灭基团分离，报告基团发出荧光。
实时荧光PCR仪在每轮循环结束后检测荧光信号的强度。
结果判定：
阳性结果：若样品中含有MON87708的DNA，荧光信号会随PCR循环数的增加而指数级累积，仪器会绘制出一条典型的“S”型扩增曲线。通过分析Ct值，即可客观判定为阳性。
阴性结果：若无目标序列，则无法进行特异性扩增，不会观察到荧光信号的显著增长。
四、 试剂盒典型组成：
PCR预混液：包含热启动DNA聚合酶、dNTPs、MgCl?及优化的缓冲体系。
引物探针混合液：针对MON87708品系特异性边界序列设计的引物和TaqMan探针（通常报告基团为FAM）。
阳性对照：含有已知MON87708目标序列的质粒DNA或基因组DNA，用于验证实验全过程的有效性。
阴性对照：不含模板DNA的溶液（如无菌超纯水），用于监测反应体系是否被污染。
内参检测系统：用于监控DNA提取质量及PCR抑制物。通常针对大豆内源基因设计，并使用不同荧光通道标记，以与目标检测区分开。
五、 操作流程详解说明：
样品DNA提取：从待测样品中提取高质量、可扩增的DNA。
反应体系配制：在无菌区，按说明书将各组分混合。
荧光PCR运行：将反应管置于实时荧光PCR仪中，运行预设的扩增程序。
结果分析：
确认阴性对照无扩增。
确认阳性对照扩增曲线正常且Ct值在预期范围。
确认所有样品的内参基因均正常扩增，表明DNA质量合格且无PCR抑制物。
最后判断待测样品：在内参正常的前提下，若目标检测通道出现特异性扩增曲线，则判定为MON87708阳性；否则为阴性。
公司正在出售的产品：
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六、 技术特点与优势：
品系特异性强：直接检测独一无二的边界序列，有效避免与其他品系的交叉反应，结果准确可靠。
灵敏度高：可检测出极低含量的MON87708成分。
抗干扰能力强：闭管操作和荧光探针技术，使其抗干扰能力优于常规PCR法。
自动化高通量：适用于口岸、检测机构进行大批量样品的快速筛查。
七、 主要应用场景：
进出口检验检疫：确保进口大豆及其产品符合国家的转基因标识法规和安全管理要求。
农产品市场监管：对市场流通的大豆、豆粕及其他加工品进行监督抽查，防止未批准的品系非法流入。
供应链管理：为食品加工企业提供原料筛查工具，确保其采购的原料符合客户要求或法规标准。
科学研究：用于转基因大豆的溯源、基因流监测等生态安全评估研究。
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