商品属性:

产品名称 | 转基因大豆品系DP305423检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P698 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品概述

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术,通过针对DP305423品系特异性DNA序列设计的引物和荧光探针,实现对样品中该转基因成分的高灵敏度、高特异性检测。该方法适用于对大豆种子、豆粕、豆油及含豆制品进行定性和定量分析,是确保转基因生物安全管理与贸易合规的关键技术。
二、 检测原理

DNA提取:从待测样品中提取纯化基因组DNA。
实时荧光PCR扩增:
特异性引物与探针:试剂盒核心包含两套独立的检测系统:
大豆内标准基因:检测大豆本身的保守基因(如Lectin基因)。该系统是实验的“质量控制”,用于确认DNA提取成功且PCR反应体系无抑制物。若内标无信号,则检测结果无效。
DP305423品系特异性序列:精准靶向该转基因品系中外源DNA插入基因组的特定边界序列。这段序列是DP305423独一无二的“身份证”,确保了检测的极高特异性,不会与其他转基因大豆品系发生交叉反应。
TaqMan水解探针技术:探针两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。在PCR循环中,当探针与模板DNA结合后,Taq DNA聚合酶在延伸DNA链时会水解掉探针,使报告基团与淬灭基团分离,从而产生荧光信号。信号的强度与模板DNA的量成正比。
信号检测与结果判定:
实时荧光PCR仪在每一个扩增循环后,检测荧光信号的强度。
通过分析荧光信号增长的动力学曲线和Ct值来判定结果:
阳性:内标基因和DP305423通道均出现典型的S型扩增曲线,且Ct值小于设定的阈值(通常为35-40)。表明样品中检测到DP305423成分。
阴性:内标基因通道扩增正常,但DP305423通道无扩增信号。表明样品中未检测到DP305423成分。
无效:内标基因通道无扩增信号。表明样品DNA质量不合格或反应体系存在问题,需重新检测。
三、 主要组成

一个完整的试剂盒通常包含:
PCR反应液:含有优化的缓冲体系、dNTPs、镁离子等。
热启动Taq DNA聚合酶:提高反应特异性和灵敏度,防止非特异性扩增。
引物探针预混液:已混合好的针对大豆内标基因和DP305423品系特异性基因的引物及荧光探针。
阳性对照:含有DP305423目标序列的DNA,用于确保整个检测流程有效。
阴性对照:非转基因大豆DNA或超纯水,用于监控实验过程是否存在污染。
DNase/RNase-Free水。
四、 技术特点与优势

高特异性:针对DP305423特有的边界序列,能准确将其与其他转基因大豆品系(如MON87705, A2704-12等)区分开。
高灵敏度:可检测出样品中极低含量的转基因成分,检测下限通常可达到0.1%或更低,满足最严格的监管要求。
定量准确:可构建标准曲线,对样品中DP305423的含量进行精确定量,这对于执行标识阈值至关重要。
快速高效:整个PCR扩增过程可在1.5-2小时内完成,适合高通量快速筛查。
防污染能力强:采用闭管检测,PCR后无需开盖进行电泳,极大降低了扩增产物污染的风险。
标准化操作:流程标准化,易于在不同实验室间实现结果的可比性和重现性。
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五、 主要应用领域

进出口检验检疫:确保进口大豆及产品符合输入国的转基因生物安全管理法规。
食品安全与标识监管:用于市场监管部门对市售大豆相关产品进行抽检,验证其标签声明的真实性。
身份保持与非转基因产品认证:在非转基因产业链中,用于对原料和产品进行溯源和纯度验证。
农业环境监测:监测田间或环境中是否存在未经授权的转基因大豆的扩散。
科学研究:在植物分子生物学和遗传育种研究中用于品系鉴定。
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