猪圆环病毒检测试剂盒(荧光 PCR 法)
检测原理:
该试剂盒的核心技术是荧光定量PCR技术,也称为实时荧光定量PCR。
核酸提取:从猪的血清、组织(如淋巴结、肺脏、脾脏)或其它病料中提取病毒的DNA。
PCR扩增:将提取的DNA与试剂盒内的特定成分混合。这些成分包括:
特异性引物:设计与PCV病毒基因组高度保守区域互补的短片段核酸,能精准识别并结合病毒DNA。
荧光探针:一条标记有报告荧光基团(如FAM) 和淬灭荧光基团的特异性探针。当探针完整时,淬灭基团会抑制报告基团的荧光发射。
产品名称 | 猪圆环病毒检测试剂盒(荧光 PCR 法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P715 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
荧光信号产生:在PCR扩增过程中,当DNA聚合酶遇到探针时,会将其水解,使报告基团与淬灭基团分离。此时,报告基团会发出荧光信号。
实时监测与定量:荧光PCR仪在每一个PCR循环结束后,会检测一次荧光信号的强度。病毒DNA的起始拷贝数越高,荧光信号累积得就越快,达到设定阈值所需的循环数(Ct值)就越小。 通过对比标准品,可以实现对病毒的绝对定量分析。

二、 主要用途与意义:
精准诊断:快速、准确地诊断猪只是否感染PCV2,区分PCVAD与其它临床症状相似的疾病(如猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟等)。
病原分型:许多试剂盒具备分型检测功能,可以同时区分PCV2a、PCV2b、PCV2d等不同基因型,以及鉴别PCV2和PCV3(另一种新型圆环病毒),为流行病学调查和防控策略制定提供关键信息。
疫苗免疫效果评估:通过监测免疫后猪群体内的病毒载量变化,评估疫苗的保护效果。
群体健康监测与净化:对种猪群、后备猪群进行定期监测,及时发现并淘汰带毒猪只,逐步建立阴性群,实现种群净化。
药物与防控方案研究:作为疗效评价和科研工作的关键工具。
三、 核心优势:
与传统的病毒分离、免疫组化(IHC)及普通PCR法相比,荧光PCR法具有显著优势:
高灵敏度:即使样本中病毒含量极低,也能被有效检出。
高特异性:针对病毒独特基因序列设计引物和探针,有效避免交叉反应。
快速高效:整个检测过程可在2-3小时内完成,实现当天出结果。
定量分析:不仅能判断“有或无”,还能精确测定病毒载量,为病情严重程度和预后判断提供依据。
安全环保:全程闭管操作,避免了PCR后处理的开盖步骤,极大降低了气溶胶污染的风险。
高通量:可同时对大量样本进行自动化检测,适合大规模筛查。
四、 典型操作流程:
样本采集与处理:无菌采集血液(分离血清)、组织病料等,并按说明书进行预处理。
核酸提取:使用商业化的核酸提取试剂盒或自动化提取仪,从样本中纯化出病毒DNA。
试剂配制:将提取的DNA、PCR反应液、引物探针混合物、酶等按比例混合,分装到PCR反应管中。
上机检测:将反应管放入荧光PCR仪,设置好反应程序(通常包括:预变性、40-45个循环的变性-退火-延伸)。
结果分析:仪器软件会自动采集荧光数据,并根据预设参数自动分析并输出结果。
五、 结果解读:
阳性:检测样本的荧光信号增长曲线呈“S”型,且Ct值小于或等于说明书规定的临界值(如Ct ≤ 35)。表明样本中含有猪圆环病毒核酸。
阴性:无典型的“S”型扩增曲线,或Ct值大于临界值(如Ct > 35,或无Ct值)。表明样本中未检测到猪圆环病毒核酸,或病毒含量低于检测下限。
无效:阳性对照和阴性对照的结果不符合预期,本次检测无效,需重新检测。
注意:Ct值的大小可以半定量地反映病毒载量水平。Ct值越小,病毒含量越高;Ct值越大,病毒含量越低。
六、 应用场景:
养殖场:用于日常健康监测、引种检测、疾病爆发时的快速诊断。
兽医诊断实验室:作为常规的病原学检测服务。
动保企业与科研机构:用于疫苗研发、药物评价和流行病学研究。
海关及检疫部门:用于进出口猪只的检疫监管。
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关键字: 猪圆环病毒;检测试剂盒;荧光PCR法;
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