商品属性:
产品名称
猪伪狂犬病病毒gE/gD(PRV-gE/PRV-gD)检测试剂盒(双重荧光PCR法)
检测方法
荧光PCR法
货号
XG-P740
应用范围
核酸的定性检测
规格
50T
用途
仅供科研研究实验
产品概述
本试剂盒采用双重荧光PCR技术,可同时检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的gE和gD基因,具有以下特点:
鉴别诊断:区分野毒感染(gE阳性)和疫苗免疫(gD阳性)
高灵敏度:检测限可达10-50拷贝/μL
高特异性:与CSFV、PRRSV等常见猪病病原无交叉反应
快速高效:全程约2小时完成检测
二、检测原理
靶基因选择:
gE基因:野毒株标志性基因(疫苗株通常缺失)
gD基因:病毒保守基因(所有毒株均含有)
荧光通道配置:
FAM通道:检测gE基因(野毒感染指示)
VIC/HEX通道:检测gD基因(病毒存在指示)
三、试剂盒组成
组分 规格 功能 保存条件
PCR反应液 1mL 含酶和反应体系 -20℃
gE/gD引物探针混合液 200μL 特异性检测 -20℃
阳性对照 100μL 含gE和gD片段 -70℃
阴性对照 1mL 无核酸酶水 室温
内参对照 100μL 监控质量 -20℃
四、操作流程
样本处理(30分钟):
采集脑组织、扁桃体等病料
提取病毒DNA
反应体系配制(15分钟):
按20μL体系配制:
反应预混液 10μL
引物探针混合液 2μL
模板DNA 3μL
无核酸酶水 5μL
PCR扩增(60分钟):
预变性:95℃ 3分钟
循环扩增(45个循环):
95℃ 15秒
60℃ 30秒
五、结果判读
结果类型 gE通道(FAM) gD通道(VIC/HEX) 临床意义
野毒感染 阳性(Ct≤38) 阳性(Ct≤38) 自然感染
疫苗免疫 阴性 阳性(Ct≤38) 疫苗反应
阴性 阴性 阴性 未感染
可疑 任何Ct>38 任何Ct>38 需复检
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六、应用价值
疫苗免疫效果评估:区分免疫应答和野毒感染
净化监测:用于伪狂犬病净化场监测
疫情诊断:快速确诊伪狂犬病感染
流行病学调查:追踪病毒传播路径
种猪检疫:保障种猪群健康状态
七、注意事项
实验操作需在PCR专用实验室进行
采样后应尽快检测或-70℃保存
定期校准荧光定量PCR仪
临床诊断需结合流行病学调查
试剂反复冻融不超过3次
上海西格生物科技有限公司
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