猪轮状病毒A组(PRV-A)检测试剂盒(荧光PCR法)
简介：
本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术，专门用于检测猪轮状病毒A组(Porcine Rotavirus A)，具有以下特点：
高灵敏度：检测限可达10-50拷贝/反应
高特异性：针对VP6基因保守区域设计，不与B组、C组轮状病毒交叉反应
快速检测：从样本处理到结果分析约2小时
多重质控：包含内参对照和阴阳性对照系统
产品名称
分类
荧光PCR
货号
XG-P744
用途
仅供科研研究实验
二、技术原理：
靶基因选择：
针对PRV-A组特异性VP6基因设计引物和探针
采用TaqMan探针技术，FAM荧光标记
检测流程：
样本RNA提取
一步法RT-PCR扩增
实时荧光监测
三、试剂盒组成：
组分 规格 功能 保存条件
PCR反应预混液 1mL 含逆转录酶和Taq酶 -20℃
PRV-A引物探针混合液 200μL 特异性检测 -20℃
阳性对照 100μL 含PRV-A RNA片段 -70℃
阴性对照 1mL 无核酸酶水 室温
内参对照 100μL 监控提取和扩增过程 -20℃
四、操作流程：
样本处理（30分钟）：
采集腹泻粪便或肠道内容物
使用配套RNA提取试剂提取病毒RNA
反应体系配制（15分钟）：
按比例混合各组分（推荐25μL体系）
每反应加入5μL模板RNA
PCR扩增（60分钟）：
逆转录：50℃ 10分钟
预变性：95℃ 3分钟
循环扩增（45个循环）：
95℃ 15秒
60℃ 30秒（荧光采集）
五、结果判读标准：
阳性判定：
FAM通道出现典型S型扩增曲线
Ct值≤38
内参对照正常
阴性判定：
无扩增曲线
无效结果：
内参对照无扩增
需重新检测
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六、应用场景：
临床诊断：仔猪腹泻病因确诊
流行病学调查：猪群轮状病毒感染监测
疫苗评估：疫苗免疫效果评价
种猪场监测：预防垂直传播
科研应用：病毒分子生物学研究
七、注意事项：
实验分区操作，防止气溶胶污染
粪便样本采集后应尽快检测或-70℃保存
定期校准荧光PCR仪光学系统
临床诊断需结合流行特点和病理变化
试剂反复冻融不超过3次
上海西格生物科技有限公司
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