商品属性:

产品名称 | 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)检测试剂盒(荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P778 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

产品概述

猪传染性胃肠炎病毒检测试剂盒(荧光PCR法)是一种用于快速、灵敏、特异地检测猪只粪便、肠道内容物或组织样本中是否含有猪传染性胃肠炎病毒的体外诊断试剂盒。
其核心原理是荧光聚合酶链式反应,通过特异性引物和荧光探针,对样本中微量的TGEV核酸进行扩增和实时检测,从而实现对病毒的定性分析。该方法已成为目前实验室诊断TGEV的主流和黄金标准方法之一。
二、 检测原理

核酸提取:首先从样本(如粪便)中提取出总RNA(因为TGEV是RNA病毒)。
逆转录:将提取的RNA通过逆转录酶反应合成互补的cDNA。
荧光PCR扩增与检测:
在PCR反应体系中,加入针对TGEV高度保守基因区域(如N基因、S基因等)设计的特异性引物和荧光标记探针。
探针通常两端分别标记有报告荧光基团和淬灭荧光基团。当两者靠近时,报告基团发出的荧光被淬灭基团吸收,仪器检测不到荧光信号。
在PCR扩增过程中,Taq酶会水解与模板结合的探针,使报告基团与淬灭基团分离,从而释放出荧光信号。
每完成一次扩增循环,就释放一次荧光信号,信号的强度与合成的DNA产物量成正比。
实时荧光PCR仪会实时监测并记录每个循环的荧光强度。当荧光信号积累到设定的阈值时,所对应的循环数称为Ct值。
结果判读:
阳性:检测孔有典型的扩增曲线,且Ct值 ≤ 试剂盒规定的判读标准(如Ct ≤ 35)。表明样本中含有TGEV核酸。
阴性:无特异性扩增曲线或Ct值大于判读标准。表明样本中未检测到TGEV核酸或病毒载量低于检测灵敏度。
三、 试剂盒组成

一个典型的试剂盒通常包含以下组分:
TGEV PCR反应液:含有引物、探针、dNTPs、缓冲液等。
逆转录酶
Taq DNA聚合酶
阳性对照:含有TGEV特定基因片段的质粒或灭活病毒,用于监控整个实验过程是否有效。
阴性对照:无RNA酶的水或无关核酸,用于确保无污染。
内标(可选):用于监控核酸提取效率和是否存在PCR抑制物,防止假阴性结果。
四、 技术特点与优势

高灵敏度:能够检测出样本中极微量的病毒核酸,非常适合早期感染和隐性感染的诊断。
高特异性:使用特异性引物和探针,能准确区分TGEV与其他猪腹泻病毒,如猪流行性腹泻病毒、轮状病毒、德尔塔冠状病毒等,避免交叉反应。
快速高效:整个检测过程(从核酸提取到结果分析)可在2-3小时内完成,远快于病毒分离等传统方法。
定量能力:通过标准曲线,可以实现对病毒载量的绝对定量,有助于评估感染严重程度和排毒量。
安全环保:无需进行活病毒操作,降低了生物安全风险。
自动化程度高:可与自动化核酸提取仪和实时荧光PCR仪配套使用,实现高通量检测,减少人为误差。
五、 应用场景

临床诊断:对出现水样腹泻、呕吐、脱水(尤其对仔猪高致死率)的猪群进行快速确诊。
疫情监测与净化:用于种猪场、核心育种群的无TGEV监测,是疫病净化项目的关键工具。
引种检疫:对引进的猪只进行检疫,防止外来病原传入。
科学研究:用于TGEV的流行病学调查、病原学研究和疫苗免疫效果评估
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关键字: 猪传染性胃肠炎病毒;检测试剂盒;荧光PCR法;
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