商品属性:

产品名称 | 玉米内源基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P804 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

产品概述

玉米内源基因检测试剂盒是一种用于定性检测样本中玉米源性成分的分子生物学产品。
该试剂盒的核心目标是检测玉米基因组中特有的、稳定存在的保守基因序列。它的主要作用是作为定性检测和过程质量控制的内参照,广泛应用于食品安全、农产品检测及转基因产品鉴定等领域。
二、 检测目标与意义

检测目标:玉米特有的内源参照基因。常用的基因包括:
Zein基因:编码玉米醇溶蛋白,是玉米特有的贮藏蛋白基因,特异性非常高。
IVR基因(富含亮氨酸重复序列基因):也是一个高度保守的玉米特异性基因。
核心意义:作为内参照或内标,其检测结果用于判断整个检测过程是否有效、可靠。
三、 检测原理(PCR-荧光探针法)

其核心原理是实时荧光定量PCR。
DNA提取:从待测样本(如玉米种子、玉米粉、含有玉米成分的加工食品等)中提取总DNA。
荧光PCR扩增与检测:
特异性引物:针对选定的玉米内源基因(如Zein基因)的保守区域设计,只能与玉米的DNA特异性结合。
荧光探针:一条与玉米内源基因靶序列互补的寡核苷酸探针,两端分别标记有荧光报告基团和淬灭基团。
实时信号释放:在PCR扩增过程中,Taq酶的5‘→3’外切酶活性会切割探针,使报告基团与淬灭基团分离,从而发出荧光信号。
信号监测:荧光PCR仪实时监测荧光强度。如果样本中含有玉米成分,该基因就会被扩增,荧光信号随之累积并超过设定的阈值。
结果判定:仪器根据荧光信号和Ct值自动判定阳性或阴性。
四、 试剂盒主要组成

PCR反应液:含有缓冲液、dNTPs、Mg2?等。
热启动Taq DNA聚合酶。
玉米内源基因特异性引物和探针混合液。
阳性对照:通常含有已知浓度的玉米基因组DNA。
阴性对照:无核酸酶水。
五、 操作流程

样本处理与DNA提取:将样本进行适当处理,并提取基因组DNA。这一步的成功与否直接影响后续检测。
试剂配制:将各组分按比例混合,分装到PCR管中。
加样:将提取的样本DNA、阳性对照、阴性对照分别加入反应管。
上机检测:将反应管放入荧光PCR仪,运行标准扩增程序(通常为:95℃预变性,随后进行40-45个循环的扩增)。
结果分析:仪器软件自动分析荧光增长曲线和Ct值。
六、 结果判读

阳性:检测通道出现典型的S型扩增曲线,且Ct值小于说明书规定的阈值。这证明:
样本DNA提取成功。
样本中含有玉米源性成分。
PCR反应体系工作正常,无抑制物存在。
阴性:无扩增曲线或Ct值大于阈值。这表明检测无效,可能原因包括:
样本中不含玉米成分。
DNA降解或提取失败。
PCR反应被严重抑制。
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关键字: 玉米内源基因;检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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