鱼源性成分(Fish)检测试剂盒(荧光PCR法)
简介:
鱼源性成分检测试剂盒是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子生物学产品。它不针对某一种特定的鱼病,而是用于鉴定样品中是否含有任何鱼类的成分。
产品名称 | 鱼源性成分(Fish)检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P807 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
核心应用:
食品真实性鉴定与打假:检测肉制品、饲料、深加工食品中是否含有未声明的鱼源性成分,防止商业欺诈。
过敏原标识与管理:对于鱼类过敏人群,检测食品中是否含有微量的、未在标签上声明的鱼成分,至关重要。
清真食品认证:确保产品中不含有被禁止的鱼类或任何鱼类成分(根据特定教义)。
物种鉴定与溯源:在鱼类产品(如鱼丸、鱼罐头)中确认其鱼种来源。
二、 检测原理:
其核心原理是利用荧光PCR技术检测鱼类基因组中高度保守的通用序列。
DNA提取:从样品(鱼肉、鱼粉、加工食品)中提取总DNA。
PCR扩增与实时检测:
反应体系中包含一对针对鱼类通用基因设计的引物和一个荧光标记探针。
常用的靶基因是线粒体细胞色素b基因,因为它在鱼类中具有种间保守性和种内特异性,非常适合作为通用检测的靶标。
如果样品中含有任何一种鱼类的DNA,PCR扩增就会发生,探针被水解,释放荧光信号。
荧光信号的强度与PCR产物的量成正比。
结果判定:通过分析荧光信号达到设定阈值的循环数,来判断样品中是否存在鱼源性成分。
三、 试剂盒组成(通常包含):
DNA提取试剂:用于从复杂基质的样品中提取DNA。
Fish PCR反应液:含有针对鱼类通用基因的引物、探针、dNTPs和缓冲液。
热启动Taq DNA聚合酶。
阳性对照:通常含有已知浓度的常见鱼类(如鲤鱼、罗非鱼)DNA。
阴性对照:无核酸酶水。
四、 操作流程:
样本制备与DNA提取:将样品研磨、匀质化,使用合适的方法提取DNA。
试剂配制:在PCR管中混合反应液、酶、模板DNA及阴阳性对照。
上机检测:
将反应管放入实时荧光PCR仪。
设置程序:预变性(~95°C)→ 40-45个循环的 [变性 + 退火/延伸/荧光采集]。
结果分析:
实验有效性判断:
阳性对照:必须有典型的S型扩增曲线。
阴性对照:必须无扩增曲线。
样本结果判定:
阳性:样本出现S型扩增曲线,且Ct值小于或等于说明书规定的判定值。表明样品中含有鱼源性成分。
阴性:样本无扩增曲线。**表明在方法检测限下未检测到鱼源性成分。
五、 主要特点与优势:
广谱性:能够检测绝大多数常见的鱼类物种,实现“一通检”。
高灵敏度:即使样品中鱼类成分含量极低(如1%或更低),也能有效检出。
高特异性:能有效区分鱼类与其他肉类(如猪、牛、羊、鸡)的成分。
抗加工干扰能力强:DNA比蛋白质更耐高温处理,因此对于经过蒸煮、油炸的加工食品,PCR法比基于蛋白质的免疫学方法(如ELISA)更具优势。
适用于复杂基质:能够从香肠、肉酱、复合调味料等产品中检测出鱼类成分。
定量潜力:可提供Ct值,通过标准曲线可以进行相对定量。
六、 应用场景
政府监管机构:用于市场监督抽查,打击在牛羊肉中掺杂廉价鱼肉、或标注为纯肉但实际混有鱼肉的欺诈行为。
公司正在出售的产品:
钙连蛋白抗体 | MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒 |
肿瘤异常甲基化蛋白1抗体 | 载玻片细胞CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
铁蛋白轻链抗体 | 蛋白激酶(A)荧光共振能量转移法(FRET)、(B)化学发光法(luminometry)、 |
D型-天冬氨酸氧化酶抗体 | 泌乳素受体抗体 |
植物过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性荧光定量检测试剂盒 | 单纯疱疹病毒2抗体 |
细胞ROCK-II激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 胰岛素样生长因子结合蛋白1抗体 |
果类果胶化学比色法定量检测试剂盒 | ADP核糖基化因子4抗体 |
荧光标记法细胞端粒酶活性TRAP电泳分析试剂盒 | 跨膜蛋白TMEM176B抗体 |
细胞RSK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | TRIM66蛋白抗体 |
细菌抗生素(多粘)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒 | HTF9C蛋白抗体 |
721型分光光度仪1毫升1厘米光径塑料比色皿 | 鱼源性成分(Fish)检测试剂盒(荧光PCR法)NF KAPPA B P65蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白单克隆抗体 | 组织CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒 |
肌球蛋白15抗体 | PE-Cy5标记人CD44单克隆抗体 |
七、 局限性及注意事项:
不能区分具体鱼种:作为通用检测试剂盒,它只能回答“有没有鱼”的问题,无法回答“是哪种鱼”。若要鉴定具体鱼种,需要使用针对该鱼种的特异性试剂盒。
DNA提取质量是关键:深度加工可能导致DNA严重降解,影响检测灵敏度。
存在PCR抑制风险:食品中的某些成分可能抑制PCR反应,导致假阴性。
无法区分物种:由于基因高度保守,它通常不能用于区分是哪种植物(如区分大豆和玉米),需要更特异的内参基因(如Lectin, Zein)来完成。
交叉污染风险:需要严格的实验室分区和操作规范。
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