HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞
产品信息：
产品名称 | HCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞 | 英文名称 | HCMECD3:HCMEC/D3 |
货号 | A01X734 | 生长特性 | 贴壁生长 |
别称:HCMEC/D3;CMEC/D3;human Cortical Microvessels Endothelial Cells/D3
种属:人
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:纺锤形细胞
冻存条件:冻存液： 通用血清型程序冻存液
温度：液氮
培养方案A（默认）:生长培养基：hCMEC/D3细胞专用培养基
培养条件：气相：空气，95%；CO?，5%, 温度：37℃
推荐传代比例:1:3-1:6
推荐换液频率:2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述:The hCMEC/D3 cell line was derived from human temporal lobe microvessels isolated from tissue excised during surgery for control of epilepsy. The primary isolate was enriched in cerebral endothelial cells (CECs). In the first passage, cells were sequentially immortalized by lentiviral vector transduction with the catalytic subunit of human telomerase (hTERT) and SV40 large T antigen, following which CEC were selectively isolated by limited dilution cloning, and clones were extensively characterized for brain endothelial phenotype. This brain microvascular endothelial cell line represents one such model of the human BBB that can be easily grown and is amenable to cellular and molecular studies on pathological and drug transport mechanisms with relevance to the central nervous system (CNS).
年龄（性别）:Adult;Female
组织来源:脑微血管
细胞类型:转化细胞系
生物安全等级:BSL-2
保藏机构:KCB; KCB 2019022YJ
细胞基本特性
形态与生长：上皮细胞样（细长梭形或多角形），贴壁生长，形成毛细血管样结构23PDF。
培养条件：气相为95%空气+5% CO2，温度37℃，湿度70%-80%；推荐使用内皮细胞专用培养基（如ECM培养基+5%FBS+1%生长因子）。
传代比例：常规1:2-1:4，每2-3天换液一次，细胞密度达80%-90%时进行传代。
冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，液氮长期保存。
关键操作流程
复苏细胞：
冻存管37℃水浴快速解冻，转移至含5-6 mL完全培养基的离心管，1000 rpm离心5 min，弃上清后重悬接种于培养瓶，培养过夜；第二天换液并检查密度。
细胞传代：
吸弃旧培养基，PBS润洗1-2次；加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA（37℃预热），消化1-2 min，镜下观察细胞间隙变大但未完全脱落时，加5 mL完全培养基终止消化；吹打混匀后，1000 rpm离心3-5 min，重悬分瓶（比例1:2-1:4）16PDF。
注意：消化时间过长会损伤细胞，操作需轻柔避免气泡6PDF。
细胞冻存：
细胞密度达80%时，胰酶消化后离心收集，用90% FBS+10% DMSO重悬，分装冻存管；程序降温（-20℃ 1.5 h→-80℃过夜→液氮）或非程序降温（4℃ 5-10 min→-20℃ 2 h→-80℃）。
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培养注意事项
收货处理：酒精消毒瓶身，显微镜检查细胞状态；静置2-4 h稳定后，观察密度决定传代或继续培养3PDF。
污染防控：操作需严格无菌，人源细胞存在潜在生物风险，建议使用二级生物安全台。
常见问题：细胞培养中黑点较多属正常现象，避免过度消化或吹打；若细胞贴壁不牢，可调整血清浓度至15%辅助贴壁。
关键字： HCMEC/D3;永生化人脑微血管内皮细胞;贴壁细胞;
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