禽肺病毒(APV)检测试剂盒(荧光PCR法)
简介:
禽肺病毒(APV)检测试剂盒(荧光PCR法)是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子诊断工具,用于特异性检测禽肺病毒核酸。
该试剂盒通过设计针对APV基因保守区的特异性引物和探针,实现高灵敏度、高特异性检测。
产品名称 | 禽肺病毒(APV)检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1071 | 用途 | 仅供科研研究实验 |

检测原理
采用TaqMan探针法,通过荧光信号实时监测PCR扩增过程。探针结合APV保守基因序列,水解后释放荧光信号,实现病毒核酸定量或定性检测。
核心组成
PCR反应液:含缓冲液、dNTPs、引物/探针混合液
酶液:含Taq酶等
阳性质控品:含已知浓度APV核酸,用于验证扩增效率
阴性质控品:无APV核酸,用于排除污染。
操作流程
样本采集:病死禽取肺组织,活禽用棉拭子取呼吸道分泌物,全血样本取血清。
核酸提取:推荐磁珠法或离心柱法提取RNA,避免反复冻融。
试剂配制:根据样本数量计算反应体系(20μL/管),分装PCR反应管。
PCR扩增:
仪器设置:FAM通道采集荧光信号,淬灭基团选择None(不选ROX校正)。
反应程序:50℃ 10min(逆转录);95℃ 2min(预变性);45循环(95℃ 15sec→60℃ 30sec,采集荧光)。
结果判定:
阳性:Ct值≤40且曲线有明显指数增长期;
阴性:Ct值>40或无Ct值。
存储与局限性
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期12个月,运输需2-8℃冰袋冷藏4。
局限性包括:样本核酸浓度过低可能导致假阴性;操作不当易致RNA降解或交叉污染;病毒基因突变可能引发假阴性。
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关键字: 禽肺病毒;检测试剂盒;荧光PCR法;
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