钙离子荧光探针Cal-520 NHS酯优势
1.低背景荧光：与Ca²⁺结合后显著增强荧光信号，能有效降低背景干扰，提高检测灵敏度。
2.多色兼容性：绿色荧光，适用于多通道成像
3.高效偶联特性：含NHS活性基团，可直接偶联抗体/IgG等生物分子
钙离子荧光探针Cal-520 NHS酯标记实验流程
此标记方案是为山羊抗小鼠IgG与Cal-520® NHS酯而开发的。对于您的特定蛋白质，您可能需要进一步优化。
注意：每种蛋白质需要不同的染料/蛋白质比率，这还取决于染料的特性。过度标记蛋白质可能会对其结合亲和力产生不利影响，而低染料/蛋白质比率的蛋白质共轭物会降低灵敏度。
运行共轭反应
1.以10:1的摩尔比（B液（染料）/A液（蛋白质））作为起始点：取95μL A液（假设蛋白浓度10mg/mL，MW~200kD，则浓度~0.05mM），加入5μL B液（10mM）。
注意：建议使用B液（染料）/A液（蛋白质）的10:1摩尔比。如果比例过低或过高，分别在5:1、15:1和20:1的染料/蛋白质比下确定合适的比例。
2.室温震荡反应30-60分钟
纯化步骤（Sephadex G-25柱示例）
1.按说明书预处理Sephadex G-25柱
2.上样反应混合物（将反应混合物加载到Sephadex G-25柱的顶部。）（来自“运行共轭反应”）
3.样品刚运行到树脂表面下方时，立即加入PBS（pH 7.2-7.4）洗脱
4.持续加入PBS缓冲液（pH 7.2-7.4）进行洗脱，直至目标样品完全流出层析柱。合并含有染料-蛋白偶联物的洗脱组分。
注意：
短期使用建议：如立即使用，必须用染色缓冲液适当稀释偶联物，按实验需求分装为单次使用量
长期保存方案：如需长期储存，染料-蛋白偶联物溶液需要浓缩或冻干。
注：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业；主要以荧光探针，分子探针，核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心，产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪，抗体标记、新药筛选等领域。