猫传染性腹膜炎（FIP)检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

猫传染性腹膜炎（FIP)检测试剂盒（荧光PCR法）

一、产品核心信息

检测靶标：猫冠状病毒(FCoV)突变株特异性基因序列

方法学：多重荧光定量PCR(可区分野毒株与FIP突变株)

临床意义：

辅助诊断湿性/干性FIP

鉴别FCoV携带状态

监测疾病进展与治疗效果

二、技术原理

1. 分子检测基础

靶基因选择：同时检测3个关键位点：

刺突蛋白(S)基因突变位点(M1058L等)

膜蛋白(M)基因特异性变异

病毒聚合酶基因保守区(内参)

2. 探针设计

通道   靶标   荧光标记   功能

FAM   S基因突变   绿色   FIPV特异性检测

HEX   M基因变异   黄色   毒力相关标志

CY5   聚合酶基因   红色   病毒载量定量

三、试剂盒组成

表：核心组分与功能

组分   规格   保存条件   功能说明

多重PCR预混液   1.2mL   -20℃   含优化缓冲体系

热启动酶混合液   200μL   -20℃   包含UNG防污染系统

三通道引物探针组   300μL   -20℃避光   冻干粉形式

阳性定量标准品   5×50μL   -80℃   103-10?拷贝/μL梯度

核酸提取试剂组   50次/盒   室温   磁珠法快速提取

四、样本采集与处理

1. 优选样本类型

湿性FIP：

腹腔/胸腔积液(首选，病毒载量最高)

腹水细胞沉淀(提高检出率)

干性FIP：

病变组织活检(淋巴结/肝脏)

脑脊液(神经型病例)

替代样本：

全血(EDTA抗凝)

粪便(需注意肠道毒株干扰)

2. 样本处理要点

液体样本：

新鲜采集后4℃保存≤48小时

长期保存需-80℃(避免反复冻融)

组织样本：

按1:3(mg:μL)比例加入裂解液

使用组织研磨器充分均质化

五、标准化操作流程

1. 核酸提取(磁珠法)

裂解：加入500μL裂解液震荡混匀

结合：加入磁珠室温孵育5min

洗涤：用70%乙醇清洗两次

洗脱：50μL洗脱缓冲液收集RNA

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