商品属性：
产品名称 | 麦ubiquitine 基因检测试剂盒(荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1154 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、检测原理与科学意义
靶基因选择
靶向Ubiquitin基因家族（如UBQ10、UBQ14）的保守序列，通过TaqMan探针（FAM/HEX标记）实时定量mRNA或DNA拷贝数，用于研究：
植物胁迫响应（干旱、盐碱等）中泛素-蛋白酶体系统的调控机制；
转基因作物中内参基因的稳定性验证。
技术特点
双重检测：部分试剂盒含内参基因（如Actin或GAPDH），同步监控样本质量；
高灵敏度：可检测低至1拷贝/μL的靶标，适用于低丰度样本（如种子胚胎）。
二、试剂盒核心组分
组分 作用说明 储存条件
核酸提取试剂 植物专用裂解液（含CTAB法优化） 室温避光
反转录预混液 含gDNA去除酶（适用于RNA检测） -20℃避光
qPCR预混液 热启动酶、dUTP/UNG防污染系统 -20℃避光
Ubiquitin引物探针 靶向UBQ10等亚型（FAM通道） -20℃避光
阳性对照 重组质粒（含靶序列） -80℃长期保存
三、样本处理与实验流程
样本采集
植物组织：叶片/根尖液氮速冻，避免RNA降解；
转基因样本：需分离不同发育阶段组织（如种子、幼苗）。
核酸提取
RNA提取建议使用柱提法（如Qiagen RNeasy Kit），DNA需去除gDNA污染。
qPCR程序
两步法：50℃ 2min（UNG）→ 95℃ 10min →（95℃ 15s → 60℃ 30s）×40循环；
数据分析：采用2^-ΔΔCt法计算相对表达量。
四、注意事项与局限性
质量控制
每批次需包含无模板对照（NTC）及阳性标准曲线（R2≥0.99）；
引物需验证与近缘物种（如大麦、水稻）无交叉反应。
应用限制
不适用于泛素化修饰位点检测（需Western blot或质谱辅助）；
多倍体植物（如六倍体小麦）需设计同源基因特异性引物。
公司正在出售的产品：
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关键字： 麦ubiquitine 基因;检测试剂盒;荧光PCR法;
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