商品属性:

产品名称 | 马、驴源性检测试剂盒(恒温荧光法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1170 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

一、 产品概述

本试剂盒是一种用于定性检测食品、饲料、中药材(如阿胶)或其他动物源性产品中是否含有马源性(Equine)和/或驴源性(Donkey)成分的分子生物学检测工具。
应用背景:
掺假鉴别:防止廉价马肉冒充高价驴肉(如驴肉火烧),或检测阿胶产品中是否使用非驴皮原料。
过敏原检测:对马肉等特定肉类过敏的人群需要明确的食品标识。
宗教与习俗:某些宗教或文化习俗禁止食用马肉,需要可靠的方法进行验证。
饲料安全:检测饲料中是否含有违禁的同类源性成分,防止疯牛病等疾病传播。
本试剂盒采用恒温荧光法(例如LAMP法或RPA法),无需昂贵的PCR仪,可在恒定温度(如60-65℃)下快速扩增目标DNA,并利用荧光染料或荧光探针实时判读结果。该方法具有操作简便、快速、高灵敏度、高特异性以及对设备要求低等特点,非常适合现场快速检测和普通实验室的常规筛查。
二、 检测原理

核心原理是环介导等温扩增(LAMP)技术,这也是恒温荧光法最常用的技术之一。
DNA提取:从待测样品(磨碎的肉样、粉末状阿胶等)中提取总DNA。
特异性引物:针对马和驴的线粒体DNA(mtDNA) 上的特定物种保守序列(如细胞色素b基因),设计4-6条特异性引物。这些引物能识别靶序列上的多个区域,
确保扩增具有极高的物种特异性,能准确区分马、驴、猪、牛等其他常见畜禽。
恒温扩增:将提取的DNA与含有引物、DNA聚合酶(具有链置换活性)、dNTPs的反应液混合。在恒温条件(通常60-65℃) 下,引物与模板结合,
DNA聚合酶启动链置换合成,在短时间内(15-60分钟)可实现10^9~10^10倍的指数级扩增。
荧光检测:
方法一(嵌入式染料):反应体系中加入SYBR Green等荧光染料。该染料会特异性地嵌入双链DNA中并发出强荧光。随着扩增产物(双链DNA)的积累,荧光信号不断增强。
方法二(荧光探针):使用特异性荧光探针,原理类似TaqMan探针,在扩增过程中产生荧光信号,特异性更高。
结果判读:通过便携式荧光检测仪或蓝光透照仪,观察实时荧光曲线或反应结束后的荧光强度。若样品中含有马或驴源性成分,则会检测到明显的荧光信号增长。
三、 试剂盒组成(以典型试剂盒为例)

马源性检测反应液:包含针对马源特异性基因的引物、缓冲液、dNTPs等。
驴源性检测反应液:包含针对驴源特异性基因的引物、缓冲液、dNTPs等。
酶混合物:包含链置换DNA聚合酶(如Bst DNA polymerase)。
荧光染料或预混有染料的反应液。
阳性对照:已知含有马或驴DNA的质粒或基因组DNA。
阴性对照:无DNA酶水或已知不含马驴成分的样品DNA(如牛DNA)。
DNA提取试剂(可能单独提供或包含在内)。
四、 操作步骤(简要流程)

样品处理与DNA提取:取适量样品,按照配套的DNA提取试剂盒步骤提取DNA。
反应体系配制:分别取马源性检测反应液和驴源性检测反应液至不同的反应管中,再加入DNA聚合酶。
加样:将提取的待测样品DNA、阳性对照、阴性对照分别加入相应的反应管中。
恒温扩增:将所有反应管置于金属浴、水浴锅或便携式恒温荧光检测仪中,在60-65℃下反应20-40分钟。
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关键字: 马、驴源性;检测试剂盒;恒温荧光法;
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