马、驴源性检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
一、 检测目的与背景
什么是“源性成分”？ “源性成分”指的是来源于特定物种的遗传物质（DNA）或蛋白质。本试剂盒检测的目标是马和驴的特异性DNA片段。
核心应用场景：食品及饲料安全
阿胶真伪鉴定：传统阿胶应以驴皮为原料，检测产品中是否含有马皮、牛皮等其他动物源性成分。
过敏原检测：对马肉过敏的人群，需要确保食品中不含有马源性成分。
宗教与习俗：在一些禁忌食用马肉的宗教或文化地区，需要确保食品符合规定。
物种鉴定：在法医学、考古学中对未知样本进行物种鉴定。
简而言之，这个试剂盒回答的问题是：“这份样品里，有没有马或驴的DNA？”
产品名称 | 马、驴源性检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1171 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
二、 检测方法概述：PCR-荧光探针法
该方法是物种鉴别检测中最先进、最特异的方法之一。
原理： 针对马和驴线粒体DNA（mtDNA） 上的物种特异性序列，分别设计独特的引物和荧光探针。
马的探针可能用FAM（绿色荧光）标记。
驴的探针可能用HEX/VIC（黄色荧光）标记。
在一个反应管中同时加入这两套系统，即可实现双重检测。
为什么选择线粒体DNA？
拷贝数高：每个细胞内有数百至数千个线粒体，因此mtDNA的拷贝数远高于核DNA。这对于深度加工、DNA可能严重降解的样品（如高温烹煮的熟肉、胶类制品）至关重要，能大幅提高检测灵敏度。
进化速度快：不同物种的mtDNA序列差异较大，更容易找到高度特异的区域来设计引物和探针，避免交叉反应。
技术优势：
高特异性：能准确区分马、驴以及其他常见家畜（如牛、猪、羊）的DNA。
高灵敏度：可检测出含量极低（如1%）的掺假成分。
定量潜力：通过标准曲线，可以进行相对定量，估算掺假比例。
快速、高通量：适合大批量样品的快速筛查。
三、 试剂盒组成
PCR反应液：包含缓冲液、dNTPs等。
酶混合物：通常为热启动Taq酶。
马/驴双重荧光PCR检测液：已混合了针对马和驴的特异性引物和探针。
阳性对照：
马源性阳性对照：含有马DNA片段。
驴源性阳性对照：含有驴DNA片段。
（有时会提供马驴混合阳性对照）
阴性对照：无DNA/RNA水，用于监测污染。
内标：非常重要。用于监控PCR反应是否被抑制（例如由食品中的香料、盐分、脂肪等引起），防止假阴性结果。内标通常用另一种荧光颜色（如ROX/CY5）标记。
四、 检测操作流程
（实验需在标准PCR实验室进行，严格分区以防污染）
样本前处理与DNA提取：
样本类型：肌肉、肝脏、血液、加工肉制品、阿胶、饲料、化妆品等。
前处理：固体样本需粉碎、匀浆。
DNA提取：使用商业化的基因组DNA提取试剂盒。提取的DNA质量和纯度直接影响检测结果。
试剂配制与加样：
按说明书配制PCR反应预混液。
分装后，分别加入待测样本DNA、阳性对照和阴性对照。
荧光PCR扩增：
将反应管放入实时荧光PCR仪。
设置标准循环程序（通常为：预变性95℃ 2分钟；然后95℃ 15秒，60℃ 1分钟，循环40次，在60℃阶段采集荧光信号）。
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