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流感A型/H5亚型/H7亚型/H9亚型检测试剂盒(四重荧光PCR法)是一种用于同时检测和区分流感病毒A型及其H5、H7、H9亚型的分子诊断工具。以下是其详细说明:
产品名称 | 流感A型/流感H5亚型/流感H7亚型/流感H9亚型检测试剂盒(四重荧光PCR法) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1206 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |

检测原理

基于荧光定量PCR技术,通过设计针对流感A型病毒(M基因)及H5、H7、H9亚型(血凝素基因)保守序列的特异性引物和TaqMan探针,实现多重核酸检测。利用不同荧光通道(如FAM、VIC、CY5等)区分各靶标,通过Ct值和熔解曲线分析判定结果
产品组成

PCR反应液:含热启动DNA聚合酶、dNTPs、Mg2?等。
特异性引物和探针:分别针对流感A型、H5、H7、H9设计,探针标记不同荧光基团。
阳性对照:含各亚型病毒核酸片段的质粒或灭菌病毒颗粒。
阴性对照:无菌无核酸酶的水或空白样本提取液。
RNA提取试剂:用于从临床样本(如咽拭子、鼻拭子)中提取病毒RNA。
检测流程

样本采集:采集患者鼻咽拭子或咽拭子,置于病毒保存液中
核酸提取:使用配套试剂盒提取病毒RNA,确保无DNA污染
反转录与预混:将RNA反转录为cDNA,按荧光PCR仪要求配置反应体系。
扩增与检测:在荧光定量PCR仪上运行程序(如50℃逆转录30分钟,95℃预变性5分钟,40个循环的94℃变性、55-60℃退火延伸),实时监测各通道荧光信号。
结果分析:根据Ct值(阈值循环数)判定阴阳性,Ct值≤35通常为阳性;通过熔解曲线或探针特异性确认亚型。
结果判定

阳性:特定通道出现S型扩增曲线,Ct值≤。
阴性:无扩增曲线或Ct值>。
无效:阴性对照出现扩增,或阳性对照Ct值异常,需重检。
性能参数
灵敏度:可检测低至10-100拷贝/μL的病毒核酸,高于传统RT-PCR方法。
特异性:通过多重引物设计和荧光通道区分,避免交叉反应。
检测时间:从样本到结果通常需2-3小时,适合快速筛查。
注意事项

实验室分区:严格划分样本处理区、试剂准备区、扩增分析区,防止交叉污染。
操作规范:佩戴手套、口罩,避免核酸酶污染;扩增产物禁止开盖操作。
试剂保存:反应液、引物探针需避光保存于-20℃,避免反复冻融。
临床意义
该试剂盒可同时检测流感A型及其高致病性亚型(如H5、H7),适用于流感季节的早期诊断、疫情监测及流行病学调查,有助于快速采取防控措施,减少传播风险。
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关键字: 流感A型/流感H5亚型/流感H7亚型/流;检测试剂盒;四重荧光PCR法;
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