商品属性：
产品名称 | 流感A型/B型/Victoria系/Yamagata系(IAV/IBV/Bv/By)检测试剂盒（四重荧光PCR法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1207 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品概述
流行性感冒病毒分为A、B、C、D四型，其中A型和B型是引起人类季节性流感的主要病原体。B型流感病毒进一步分为两个主要谱系：Victoria系（Bv） 和 Yamagata系（By）。精确区分流感病毒类型和B型谱系，对于临床用药指导、流行病学监测和疫苗株选择具有至关重要的意义。
本试剂盒采用四重实时荧光逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术，用于定性检测人咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物等呼吸道样本中的四种目标：
甲型流感病毒（Influenza A Virus, IAV）
乙型流感病毒（Influenza B Virus, IBV）
乙型Victoria系流感病毒（IBV-Victoria）
乙型Yamagata系流感病毒（IBV-Yamagata）
核心价值：
一管四检，全面覆盖：一次实验即可完成对流感主要类型和B型谱系的鉴定。
精准分型，指导临床：
快速区分A/B型，有助于早期判断病情和潜在风险（A型易引起大流行）。
明确区分Bv和By，为公共卫生部门监测优势毒株、评估疫苗匹配度提供关键数据。
高时效性：为抗病毒药物（如奥司他韦）的合理使用提供依据（对A、B型均有效）。
取代传统分型方法：比病毒分离和血清学分型更快速、更灵敏。
二、 检测原理
流感病毒的遗传物质为分节段的单股负链RNA，因此检测必须先进行逆转录（RT）。
核酸提取：从呼吸道样本中提取总病毒RNA。
逆转录与四重荧光PCR扩增：
逆转录：反应第一步，逆转录酶将病毒RNA逆转录为cDNA。
特异性引物与探针：试剂盒包含四套独立且互不干扰的引物和探针系统。每条探针都标记有独特的报告荧光基团和淬灭基团。
IAV检测系统：探针标记FAM（绿色荧光）。
IBV检测系统：探针标记HEX/VIC（黄色荧光）。
IBV-Victoria检测系统：探针标记ROX（红色荧光）。
IBV-Yamagata检测系统：探针标记CY5（远红色荧光）。
实时检测与多重区分：
在PCR扩增过程中，四套系统在同一反应管中并行工作。
实时荧光PCR仪在每轮循环后，在四个不同的荧光通道分别采集信号。
通过哪个通道出现S型扩增曲线，即可判定样本中含有哪种病毒。
Ct值判定：各通道荧光信号突破预设阈值的循环数（Ct值）与相应病毒的起始载量相关。
三、 试剂盒组成（以典型试剂盒为例）
四重PCR反应液：包含针对四种目标的引物、缓冲液、dNTPs等。
酶混合物：包含热启动Taq DNA聚合酶和逆转录酶的预混酶。
阳性对照：
可能为混合阳性对照（含有四种病毒的核酸片段）。
或为四个独立的阳性对照。
阴性对照：无核酸酶水。
内标（Internal Control, IC）：用于监控样本提取和扩增过程，防止假阴性。内标通常使用第五个荧光通道（如Cy5.5，如果未用Cy5）或与其中一个通道共用（需通过熔点曲线分析区分）。
四、 操作步骤（简要流程）
前提： 在标准分子生物学实验室进行，严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），使用带滤芯的吸头。
样本采集与处理：使用专用采样管（通常含病毒保存液）采集呼吸道样本。采样管中的保存液通常已含有灭活成分。
核酸提取：从样本保存液中提取病毒RNA。建议在提取时加入外源性内标。
反应体系配制：在试剂准备区，将四重PCR反应液、酶混合物等配制为主反应混合液。
加样：将主反应混合液分装至PCR管/板，然后分别加入提取的样本RNA、阳性对照和阴性对照。
上机扩增：将反应管放入可支持四通道检测的实时荧光PCR仪中，设置程序。典型程序：
逆转录：50℃ 10-30分钟。
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关键字： 流感A型/B型/Victoria系/Ya;提取试剂盒;四重荧光PCR法;
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