柯萨奇病毒 A2 型 / 柯萨奇病毒 A4 型检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 )
简介：
检测原理与设计特点
双重荧光PCR技术
靶基因：针对A2和A4型的保守基因区（如VP1或5'UTR）设计特异性引物和探针，通过不同荧光标记（如FAM/VIC）区分两种病毒。
灵敏度：可检测低至10-100拷贝/μL的病毒RNA，显著高于常规PCR或免疫学方法。
多重检测优势
单次反应同时鉴别A2和A4型，节省样本和时间，适用于混合感染筛查（如手足口病暴发期）。
产品名称 | 柯萨奇病毒 A2 型 / 柯萨奇病毒 A4 型检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 ) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1251 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
二、试剂盒组成（示例）
组分 作用 保存条件
病毒裂解液 释放RNA 室温（避光）
逆转录酶混合液 RNA逆转录为cDNA -20℃（避免反复冻融）
双重PCR预混液 含引物、探针、Taq酶 -20℃（避光）
阳性对照（A2/A4型） 质控标准品 -70℃长期保存
三、操作流程（关键步骤）
样本采集与处理
推荐样本：咽拭子（首选）、粪便、脑脊液（重症病例）。
灭活处理：56℃ 30分钟灭活病毒，降低生物风险。
RNA提取
使用配套磁珠法提取柱，避免抑制剂残留影响扩增效率。
PCR扩增程序
逆转录：50℃ 15分钟
预变性：95℃ 3分钟
扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 45秒（荧光采集）
仪器兼容性：适配ABI 7500、Bio-Rad CFX等主流荧光PCR仪。
四、结果解读与临床意义
结果类型 荧光信号（Ct值） 临床提示
A2型阳性 FAM通道Ct≤35，VIC通道无信号 当前A2型感染，需关注疱疹性咽峡炎
A4型阳性 VIC通道Ct≤35，FAM通道无信号 当前A4型感染，可能伴发热、皮疹
双重阳性 双通道Ct均≤35 混合感染，需警惕重症风险
阴性 双通道Ct＞35或无扩增曲线 需结合症状和流行病学史判断
五、注意事项与局限性
质量控制
每批次必须包含阴性对照（无模板）和阳性对照（A2/A4型标准品），防止假阳性/假阴性。
采样时间窗口
发病后3-5天咽拭子病毒载量最高，晚期样本建议检测粪便或血清抗体辅助诊断。
局限性
不能区分活病毒与非感染性RNA残留，治愈期可能持续阳性。
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关键字： 柯萨奇病毒 A2 型 / 柯萨奇病毒 A;检测试剂盒;双重荧光PCR法;
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