产品信息:

产品名称 | BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纤维细胞 | 英文名称 | BALB3T3cloneA31:BALB/3T3 clone A31 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 生长特性 | 贴壁生长 |
货号 | A01X1035 | 种属 | 小鼠 |
种属:小鼠
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:成纤维细胞样
冻存条件:冻存液: 无血清非程序冻存液
温度:液氮
培养方案A(默认):生长培养基:DMEM+10% FBS +1% P/S
培养条件:气相:空气,95%;CO?,5%, 温度:37℃
推荐传代比例:1:2-1:3
推荐换液频率:2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述:BALB/3T3 clone A31细胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年从裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的几株细胞之一。BALB/3T3 clone A31细胞对接触抑制特别敏感,生长需高倍数稀释,饱和浓度低。此外,BALB/3T3 clone A31细胞对癌基因DNA病毒SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。
年龄(性别):14-17FD;Sex unspecified
组织来源:胚胎;成纤维细胞
细胞类型:自发永生化细胞
生物安全等级:BSL-1
保藏机构:ATCC; CCL-163 ECACC; 86110401

培养操作要点

培养体系与条件:
基础培养基为DMEM(含高糖),添加10%胎牛血清(FBS)、1%双抗(青链霉素),培养条件为37℃、5% CO?、95%空气,湿度70%-80%。
注意:培养基pH敏感,建议使用含1.5 g/L碳酸氢钠的DMEM,并避免频繁换液(每2-3天换液一次)。
传代操作:
细胞密度达80%-90%时传代,消化液为0.25%胰酶(可加0.53 mM EDTA),消化时间2-10分钟(随培养时间延长而增加),显微镜下观察细胞变圆、间隙增大时终止消化。
传代比例1:2至1:4(初次建议1:2),离心收集细胞后重悬接种新瓶。
难消化时采用分次消化法:首次消化3-5分钟后收集悬浮细胞,剩余贴壁细胞继续消化至脱落。
形态与生长特性:
贴壁生长,形态多样:低密度时呈不规则或梭形,高密度时(≥80%)呈规则纤维状或“鹅卵石”样单层排列。
增殖偏慢,倍增时间约26-30小时,培养过程中可能出现10%活漂浮细胞及碎片,属正常现象,建议保留漂浮细胞。
常见问题处理:
形态异常:多因密度过低,建议高密度传代(铺满瓶底)3。
消化困难:严格控制消化时间,轻柔吹打,避免机械损伤;培养基颜色偏紫(碱性)时及时换液。
代次影响:细胞超过30代后,部分分子表达(如VCAM-1、MAdCAM-1)下降,建议使用低代次细胞(≤30代)。
应用与注意事项

应用方向:适用于血脑屏障模型构建、神经毒性研究、血管新生实验(如Transwell迁移、管腔形成实验)及药物靶向递送测试。
关键提醒:
细胞对温度和pH敏感,培养基复温4小时以上再使用。
收到细胞后需立即消毒、静置,并检查密度与贴壁情况,按需传代或复苏。
生物安全等级为BSL-1或2,仅限科研使用。
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关键字: BALB/3T3 clone A3;小鼠胚胎成纤维细胞;贴壁细胞;
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