MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
产品信息：
产品名称 | MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14 | 英文名称 | MC3T3E1subclone14:MC3T3-E1subclone 14 |
货号 | A01X1077 | 生长特性 | 贴壁生长 |
种属:小鼠
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:成纤维细胞样
冻存条件:冻存液： 无血清非程序冻存液
温度：液氮
培养方案A（默认）:生长培养基：MEMα+10% FBS +1% P/S
培养条件：气相：空气，95%；CO₂，5%, 温度：37℃
推荐传代比例:1:3-1:6
推荐换液频率:2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述:从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆，从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14在抗坏血酸和3-4 mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。MC3T3-E1 Subclone 24和MC3T3-E1 Subclone 30在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化，不形成ECM，可以作为MC3T3-E1 Subclone 4和MC3T3-E1 Subclone 14的阴性对照。矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA及唾液酸糖蛋白（BSP）、骨钙素（OCN）和甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质，表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1，一种成骨细胞相关转录因子。植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨，低分化细胞只是产生纤维组织。这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型，尤其是ECM信号。它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。
年龄（性别）:<1D;Sex unspecified
组织来源:颅顶骨
细胞类型:自发永生化细胞
生物安全等级:BSL-1
基因表达情况:collagen
致瘤性:Yes, in immunodeficient mice (forms bone-like ossicles).
保藏机构:ATCC; CRL-2594
基本信息
细胞来源与特性：
来源于C57BL/6小鼠的颅顶骨
成纤维细胞样形态，贴壁生长
自发永生化细胞系
保藏机构：ATCC; CRL-25941
培养条件
培养基配置：
生长培养基：MEMα + 10% FBS + 1% P/S
培养条件：37℃，5% CO?，95%空气
换液频率：2-3次/周23
传代操作：
传代比例：1:3-1:4
消化时间：2-3分钟
消化液：0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA
传代步骤：PBS润洗→加入胰酶消化→显微镜下观察细胞变圆→加入含血清培养基终止消化→离心收集→重悬接种
冻存条件：
冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO
液氮保存
成骨诱导分化
诱导培养基配置：
基础培养基：MEMα + 10% FBS + 1% P/S
添加成骨诱导添加剂（抗坏血酸和3-4mM无机磷酸盐）
诱导步骤：
细胞融合度达到80-90%时进行诱导
加入预热的成骨诱导分化完全培养基
每48-72小时更换新鲜诱导培养基
诱导培养2-4周
分化特点：
在含抗坏血酸和3-4mM无机磷酸盐培养基中生长表现出高水平的成骨细胞分化
10天后形成矿化良好的细胞外基质（ECM）
矿化亚克隆表达成骨细胞标记的mRNA，包括唾液酸糖蛋白（BSP）、骨钙素（OCN）等
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关键字： MC3T3-E;小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14;贴壁细胞;
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