C28/I2人正常软骨细胞说明书
细胞名称:C28/I2人正常软骨细胞(ATCC来源,SV40永生化)
来源:1关节软骨组织,经SV40基因转化
用途:仅限科研(关节炎病理、软骨修复机制研究等)
一、细胞特性
生长特性:贴壁生长,形态呈长梭形或不规则
生理功能:分泌II型胶原及细胞外基质,响应IGF-1、IL-1等生长因子
优势:稳定性强,模拟体内软骨细胞行为,操作难度低于原代细胞
二、培养条件
培养基:90%高糖DMEM + 10% FBS + 1%双抗
温度:37℃
CO₂浓度:5%
传代比例:1:2至1:3(密度达80%-90%时)
换液频率:每2-3天一次
操作流程:
复苏
37℃水浴解冻冻存管,离心后重悬于完全培养基,接种T25瓶。
静置4小时稳定细胞状态,再更换新鲜培养基。
传代
胰酶消化1-2分钟(镜下观察细胞边缘收缩即终止)。
吹打后按比例分瓶,补加6-8mL完全培养基。
冻存
冻存液配方:50%培养基 + 40%血清 + 10% DMSO。
常见问题处理
生长缓慢:提高血清浓度(≤20%)或消化后重新接种。
pH值异常:检查CO₂浓度(5%-10%对应NaHCO₃浓度2.0-3.7g/L)。
污染处理:立即丢弃培养物,启用抗生素除菌
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