L Wnt-3A 小鼠成纤维细胞
产品信息:

L Wnt-3A 小鼠成纤维细胞是由 L 细胞(小鼠成纤维细胞系 L929)经基因改造后稳定表达 Wnt3A 蛋白的细胞系,主要用于分泌活性 Wnt3A 蛋白(用于条件培养基支持干细胞培养)和研究 Wnt/β-catenin 信号通路。
产品名称 | L Wnt-3A 小鼠成纤维细胞 | 英文名称 | LWnt3A:L Wnt-3A |
货号 | AXB7176 | 生长特性 | 贴壁生长 |
基本特性
来源与背景:由 L929 小鼠成纤维细胞(或 L-M(TK-) 细胞)经 Wnt-3A 基因转染构建,稳定分泌 Wnt3A 蛋白,用于干细胞培养和信号通路研究。
形态与生长:贴壁生长,
培养条件:
基础培养基:DMEM(高糖) + 10% 胎牛血清(FBS) + 1% 青霉素/链霉素(P/S);需添加 G418(0.4 mg/mL)进行筛选。
培养环境:37°C、5% CO₂、95% 空气。
冻存与复苏:
冻存液:90% FBS + 10% DMSO(或无血清冻存液);液氮储存。
复苏:37°C 水浴快速解冻,离心去除冻存液后接种于培养瓶。
培养操作流程
传代(细胞密度达 80%-90% 时):
弃培养上清,PBS 洗涤 1-2 次;加 0.25% 胰酶(含 EDTA)消化 1-2 分钟(37°C),显微镜下观察细胞变圆后终止消化。
离心(1000 rpm,4 分钟),弃上清,加培养基重悬;按 1:2 至 1:5 比例分瓶(或 1:3-1:4 传代比例)。
换液:每 2-3 天更换新鲜培养基。
注意事项:
收到细胞后检查包装完整性及污染情况(细菌、真菌、支原体);贴壁细胞可直接消化传代,悬浮细胞需离心收集。
培养基需预热(37°C),操作过程避免污染。
实验应用与关键特性
主要应用:
制备 Wnt3A 条件培养基(用于维持胚胎干细胞或类器官的未分化状态)。
研究 Wnt 信号通路、癌症模型(如结直肠癌)及药物筛选(如 Wnt 抑制剂)。
关键特性:
组成型分泌 Wnt3A 蛋白,需通过条件培养基收集活性蛋白。
生物安全等级 1,支原体检测阴性(部分品牌)。
保藏机构:ATCC(CRL-2647)。

基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
公司正在出售的产品:
Rhesus antibody Rh Rho C RhoC抗体 规格 0.1ml | Rhesus antibody Rh CHRNB2 型乙酰胆碱受体B2抗体 规格 0.2ml |
ABCD4 英文名称: 三0酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体 0.2ml | prolactin 大鼠催乳素Multi-class antibodies规格: 48T |
MARVELD1 英文名称: 候选抑制基因MARVELD1抗体 0.2ml | CD35 英文名称: Ⅰ型补体受体抗体(C3b/C4b受体抗体) 0.1ml |
Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 内脂素/内脏脂肪素(人:N端多肽)、内脏脂肪素、 又称:前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素Multi-class antibodies规格: 0.5mg | Rhesus antibody Rh Ubiquitin/UBC/UB 泛素蛋白抗体 规格 0.2ml |
基质金属蛋白酶-3抗体 Anti-MMP-3 0.1ml | CT74 英文名称: /抗原74抗体 0.2ml |
CC16(Mouse Clara cell protein) ELISA Kit 小鼠克拉拉细胞蛋白Multi-class antibodies规格: 48T | Anti-AARS2 /FITC 荧光素标记丙氨酰tRNA合成酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
APOA1 英文名称: 载脂蛋白A1抗体 0.1ml | LF/LTF Ab-Ig(Human Lactoferrin antibody IgG) ELISA kit 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 48T |
Anti-PCNA/FITC 荧光素标记增殖细胞核抗原抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | CHCHD2 英文名称: NS2反式调节蛋白/衰老相关的基因10蛋白抗体 0.2ml |
Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体(O139菌型)Multi-class antibodies规格: 0.5mg | L Wnt-3A 小鼠成纤维细胞AGPA/PCA(Human anti-gastric parietal cell antibody) ELISA Kit 人抗胃壁细胞抗体 |
Anti-Hpt/HP /FITC 荧光素标记结合珠蛋白/触珠蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | C6orf123 英文名称: 6号染色体开放阅读框123抗体 0.2ml |
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字: L Wnt-3A; 小鼠成纤维细胞;贴壁细胞;
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