BxPC-3人胰腺导管腺癌细胞

                                                           BxPC-3人胰腺导管腺癌细胞
产品信息：

BxPC-3细胞是一种人胰腺导管腺癌细胞系，广泛用于胰腺癌研究，包括肿瘤生物学、药物筛选和信号转导机制等。以下是关于BxPC-3细胞的详细介绍、培养操作及其特性：

细胞特性：

来源：BxPC-3细胞系源自一位61岁女性胰腺腺癌患者的原位胰腺腺癌活检组织，首次分离于1986年。

形态：细胞呈上皮细胞样，贴壁生长。

分子特征：BxPC-3细胞不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR)，不携带胰腺癌常见的KRAS突变，但具有p53基因突变和SMAD4表达缺失。表达细胞角蛋白（Cytokeratin）和上皮细胞黏附分子（EpCAM），低水平表达癌胚抗原（CEA）。

致瘤性：在无胸腺裸鼠中具有致瘤性，接种后可形成肿瘤。

应用：BxPC-3细胞广泛用于胰腺癌的基础研究、药物筛选和治疗策略探索，特别是作为KRAS野生型胰腺癌个体化治疗研究的体外模型。

培养条件：

培养基：推荐使用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）。

培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

传代比例：1:3 至 1:5，当细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

冻存条件：使用含有 90% 血清和 10% DMSO 的冻存液，液氮长期保存。

培养操作：

复苏细胞：

将冻存管在 37℃ 水浴中迅速解冻，转移至含有 5-6 mL 完全培养基的离心管中，1000 rpm 离心 5 分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，37℃ 培养过夜。

细胞传代：

弃去旧培养基，用 PBS 润洗细胞后加入胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃ 孵育至细胞脱落（通常 3-5 分钟）。

加入含血清的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞分散。

离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按适当比例分装至新的培养瓶中。

冻存细胞：

收集对数生长期的细胞，离心后弃去上清液，用冻存液重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准程序逐步降温后存放于液氮罐中。

注意事项：

BxPC-3细胞贴壁较牢固，胰酶消化时需严格控制时间，避免过度消化导致细胞损伤。

推荐使用低代次细胞（P15-P25）进行关键实验，以确保实验结果的可靠性。

BxPC-3细胞作为一种人胰腺导管腺癌细胞系，在胰腺癌研究中具有重要应用价值。通过规范的培养操作，可以确保细胞的正常生长和实验的可靠性。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。