LS174T人结肠癌细胞

产品信息：

LS174T细胞是一种人结肠腺癌细胞系，广泛用于结直肠癌研究，包括肿瘤生物学、药物筛选和信号转导研究。以下是关于LS174T细胞的详细介绍、培养操作及其特性：

细胞特性：

来源：LS174T细胞系源自一名58岁女性的结肠腺癌，是LS180细胞系的胰蛋白酶化变种。

形态与生长：细胞呈上皮细胞样形态，贴壁生长。

分子特征：LS174T细胞产生大量的癌胚抗原(CEA)，并表达直肠抗原3和角蛋白。该细胞系与结直肠癌相关信号通路和基因表达研究密切相关。

应用领域：广泛应用于结直肠癌研究，包括肿瘤发生机制、药物筛选、信号转导和基因功能研究等。

培养条件：

培养基：通常使用MEM培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（青霉素/链霉素）。

气体环境：95%空气 + 5% CO₂。

温度：37℃。

传代比例：推荐1:2至1:4的比例进行传代，每2-3天传代一次。

培养操作：

细胞复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速在37℃水浴中解冻。

将细胞悬液转移至含有5-6 mL完全培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，将细胞悬液加入培养瓶中，37℃培养过夜。

细胞传代：

当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

弃去旧培养基，用PBS洗涤细胞1-2次。

加入适量胰酶消化细胞，显微镜下观察细胞变圆后，用新鲜培养基终止消化。

轻轻吹打细胞，使其脱落并均匀分散，离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按比例分装至新的培养瓶中。

补充新鲜培养基，继续培养。

细胞冻存：

收集对数生长期的细胞，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

用冻存液（90% FBS + 10% DMSO）重悬细胞。

将细胞悬液分装至冻存管中，程序降温后转入液氮或-80℃保存。

优点：

研究价值：LS174T细胞系保留了结肠腺癌的特征，是研究结直肠癌机制、药物反应及基因功能的重要模型。

生长特性：贴壁生长的上皮细胞样形态使其适用于多种细胞生物学实验。

缺点：

局限性：作为单一细胞系，不能完全代表结直肠癌的异质性，可能存在特异性偏差。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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