产品信息:

C2C12 (P12 from GeXinjie) 是一种小鼠成肌细胞系,贴壁生长,培养时需使用 DMEM 培养基添加 10% FBS 和 1% P/S,在 37℃、5% CO₂ 条件下培养,细胞贴壁较弱,消化时间需严格控制。
细胞特性
来源:由 D. Yaffe 和 O. Saxel 建立的小鼠成肌细胞株亚克隆,来源为 C3H 小鼠骨骼肌。
产品名称 | C2C12,P12(fromGeXinjie)细胞 | 英文名称 | C2C12P12fromGeXinjie:C2C12, P12 (from Ge Xinjie) |
货号 | AXB6160 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
生长特性:贴壁生长,贴附性较弱,易受温度变化或震荡影响而脱落;生长较快,需每日观察密度。
功能特性:在低血清条件下可分化为可收缩的肌管,形成骨骼肌束;可被骨形态发生蛋白 2(BMP-2)诱导转为成骨细胞表型。
培养条件
培养基:DMEM + 10% FBS + 1% P/S;部分来源建议使用 RPMI 1640 替代 DMEM。
培养环境:37℃、5% CO₂ 培养箱,湿度 70%-80%。
传代比例:1:3 至 1:6,推荐播种密度 1×10⁴ cells/cm²;生长至 80%-90% 汇合度时传代。
换液频率:每 2-3 天更换一次培养基。
操作步骤
复苏:液氮取出冻存管,37℃水浴快速解冻(保留少量冰晶),转移至含预热培养基的离心管,1000 rpm 离心 5 分钟,弃上清后重悬接种;复苏后 24 小时观察贴壁情况。
传代:弃旧培养基,PBS 轻柔润洗;加入预热胰酶(如 Accutase 或 0.25% Trypsin-EDTA),37℃消化 30 秒至 2 分钟(显微镜下观察细胞回缩、间隙变大),轻柔吹打终止消化,离心(1000 rpm,5 分钟)后重悬分瓶;传代后建议 24 小时换液去除死细胞。
冻存:对数生长期细胞离心收集,用 90% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液重悬(细胞密度 1×10⁶/mL 以上),程序降温盒逐步降温后转入液氮;冻存 24 小时后建议复苏检测活性。
注意事项
贴壁弱:运输震荡、低温或试剂过冷易导致细胞回缩、脱落,操作时需轻柔,及时放回培养箱静置可恢复。
密度控制:密度过低生长缓慢,过高或长时间高密度培养易受损,建议 80% 汇合度时传代。
背景黑点:培养中少量黑点为代谢产物或碎片,不影响生长;较多时可通过 PBS 润洗或换液清除。
分化控制:培养时血清浓度需保持高(如 10% FBS),避免饥饿状态以防提前分化。
研究应用
肌肉生物学:研究骨骼肌发育、分化、基因表达及肌管形成机制。
药物筛选:评估潜在药物对肌肉代谢、增殖及分化的效应(如胰岛素信号、葡萄糖代谢)。
转染模型:适合作为基因转染宿主,研究肌肉相关蛋白功能。

具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
公司正在出售的产品:
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Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit 小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA | Calponin 1 英文名称: 钙调节蛋白-1抗体 0.1ml |
关键字: COV318;人卵巢癌细胞;贴壁细胞;
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