产品信息：
IA-LM细胞是一种人源或鼠源的大细胞癌细胞系，具有贴壁或悬浮生长特性，具体生长方式需参考细胞说明书。以下是其核心培养操作和特性说明：
产品名称 | IA-LM细胞 | 英文名称 | IALM:IA-LM |
货号 | AXB6345 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
细胞培养操作
复苏细胞
冻存管解冻：37℃水浴快速摇晃至完全融化，加入5mL预热培养基混匀。
离心处理：1000RPM离心5分钟，弃上清，用4-6mL完全培养基重悬后接种至T25瓶，37℃、5%CO₂培养箱培养过夜。
换液：第二天更换新鲜培养基，并检查细胞密度。
细胞传代
贴壁细胞：
细胞密度达80%-90%时进行传代。弃上清，PBS清洗1-2次，加入1-2mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入含血清的完全培养基终止消化。
轻轻吹打成单细胞悬液，1000RPM离心8-10分钟，弃上清，用1-2mL培养基重悬，按1:2至1:5比例分瓶（新瓶补足培养基至5-6mL）。
悬浮细胞：
直接收集细胞悬液，1000RPM离心8-10分钟，弃上清，用1-2mL培养基重悬后按1:2至1:5比例分瓶；或采用半数换液方式，弃半量培养基后将剩余细胞悬液按1:2至1:3比例分瓶。
细胞冻存
生长状态良好时进行冻存：弃培养基，加入少量胰酶消化细胞，离心收集细胞沉淀，去除上清后按冻存数量加入无血清冻存液（如含10%DMSO），直接放入-80℃冰箱或液氮罐保存。
培养注意事项
收到细胞后处理：用75%酒精消毒培养瓶外表面，放入培养箱静置2-4小时缓冲，然后观察细胞状态。
培养液更换：未达80%汇合度时，留5-6mL完全培养基继续培养；超过80%时需传代。
污染防控：严格无菌操作，培养瓶盖需拧松（密封培养瓶），避免频繁开封导致污染。
细胞特性
生长特性：可贴壁或悬浮生长，部分细胞贴壁不牢易脱落，需离心重悬后接种。
传代方法：推荐首次传代比例为1:2，后续按1:2至1:3传代，每周换液2-3次。
培养条件：37℃、5%CO₂培养箱，使用完全培养基（如HamF10+10%FBS）。
形态特征：具体形态需参考细胞说明书，部分批次可能呈上皮细胞样或成纤维细胞样。
物种来源：人源或鼠源等
常见问题及处理
细胞分布不均：消化时分散成单细胞悬液，接种时沿孔壁加入并轻敲培养板边缘使细胞均匀分布。
生长缓慢：适当提高血清浓度（最高不超过20%），或消化后转移到较小培养瓶中增加细胞密度。
污染或死亡：若收到细胞后发现污染、瓶身破损或细胞未存活，需在规定时间内（如48小时内）提供清晰细胞状态照片，供应商可重发。
具体特点如下：
环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。
生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
培养操作要点：
基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置：
温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。
pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。
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关键字： IA-LM;贴壁细胞;
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