Kelly细胞
产品信息:

Kelly细胞是一种人神经母细胞瘤细胞系,常用于癌症研究,尤其是神经母细胞瘤的机制研究、药物筛选和靶向治疗评估。
产品名称 | Kelly细胞 | 英文名称 | Kelly:Kelly |
货号 | AXB6365 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞特性
来源与背景:Kelly细胞源自一名15岁女性神经母细胞瘤患者的骨髓,属于MYCN基因扩增亚型,是研究神经母细胞瘤的重要模型。
形态与生长:细胞呈神经母细胞样形态,贴壁生长,具有较高的增殖活性。
分子特征与应用:MYCN基因扩增,表达神经母细胞瘤相关标志物,适用于研究肿瘤发生机制、药物敏感性(如GD2抗体)、耐药机制及细胞疗法评估等。
培养条件
培养基与环境:推荐使用RPMI-1640培养基,添加10%胎牛血清(FBS)、1% GlutaMAX和1% NEAA,37℃、5% CO₂、高湿度培养箱中培养。
传代与冻存:传代比例1:3-1:6,每2-3天换液一次;冻存条件为90%FBS+10%DMSO,液氮长期保存。
培养操作
复苏:从液氮中取出冻存管,迅速放入37℃水浴中解冻,将细胞悬液转移至含有5-6 mL预温完全培养基的离心管中,1000 rpm离心3-5分钟,弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞后接种于T25培养瓶或6 cm培养皿,培养过夜。
传代:当细胞密度达到80%-90%时进行传代。弃去旧培养基,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,加入1-2 mL消化液(0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA)于37℃消化1-2分钟,显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落时,加入5 mL以上含10%血清的完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞脱落,离心收集细胞(1000 rpm,8-10分钟),弃去上清液,用1-2 mL培养基重悬,按1:3至1:6比例分到新的培养瓶中,补充5-6 mL完全培养基,继续培养。
冻存:选择生长状态良好的细胞,用PBS清洗一次,加入适量胰酶消化液使细胞脱落,制成细胞悬液,1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,用适量的冻存液重悬细胞,分装至冻存管中,先将细胞冻存管放置于-80℃冰箱中保存2小时以上,然后转入液氮罐中长期保存。
优点与局限性
优点:作为神经母细胞瘤模型细胞,实验重复性强,转染效率高,适合机制研究和药物筛选;模拟神经母细胞瘤发生及耐药机制。
局限:单一细胞系不能完全代表神经母细胞瘤异质性,需结合体内模型验证。
注意事项:收到细胞后检查瓶体完整性及污染迹象,75%酒精消毒表面,显微镜观察细胞状态并拍照留存;运输用的培养基不可再用于细胞培养,需换新配制完全培养基;首次传代建议保留原瓶培养基对比培养。

细胞类型与特性:

原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-50代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
特殊细胞的生物特性举例:

成纤维细胞:具丰富粗面内质网、高尔基体,能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质;在外伤刺激下可恢复幼稚状态,参与组织修复。
肿瘤细胞:具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性,常用于药物筛选与癌变机制研究。
神经干细胞:具多向分化潜能(可分化为神经元、星形胶质细胞等),增殖能力强,在体外培养中可形成克隆球。
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
公司正在出售的产品:
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CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽Multi-class antibodies规格: | Nogo B receptor 英文名称: 轴索过度生长抑制因子B受体抗体 0.2ml |
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C1q rat (ELISA Kit) 大鼠补体片断C1q | Kelly细胞Anti-IKB alpha 核因子κB抑制蛋白α抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
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关键字: Kelly;贴壁细胞;
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