产品信息:

NCI-H345[H345]细胞是一种人小细胞肺癌细胞系,源自40岁男性肺组织,呈上皮样形态,具有贴壁或悬浮的混合生长特性;培养时需使用DMEM/F12培养基(含10%FBS及多种添加剂),37℃、5% CO₂环境,传代比例1:3,2-3天传一代。
产品名称 | NCI-H345[H345]细胞 | 英文名称 | NCIH345H345:NCI-H345 [H345] |
货号 | AXB6535 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
细胞特性
来源与背景:源自40岁男性肺小细胞肺癌组织(骨髓转移),种属为人,肿瘤类型为小细胞肺癌。
形态与生长:上皮细胞样,混合生长状态(悬浮多细胞聚集物及少部分贴壁),部分培养条件下呈贴壁或悬浮生长。
分子特征:未查询到具体分子标志,作为小细胞肺癌细胞系,可能表达神经内分泌标志物(如突触素、嗜铬粒蛋白A)。
培养条件
培养基:DMEM/F12 Medium + 0.005mg/ml Insulin + 0.01 mg/ml Transferrin + 30 nM Sodium selenite +10 nM Hydrocortisone+10 nM beta-estradiol+2 mM L-Glutamine Solution + 10% FBS ;部分方案可用RPMI1640+10%FBS。
培养环境:37℃,5% CO₂,饱和湿度培养箱。
传代与冻存:传代比例1:3,细胞密度达80%-90%时传代,2-3天传一代;冻存液为90%FBS+10%DMSO,液氮或-80℃保存。
培养操作
复苏细胞:冻存管37℃水浴快速解冻,加入4-6mL完全培养基混匀;1000rpm离心5分钟,弃上清,用新鲜培养基重悬后接种至T25培养瓶(或10cm皿),37℃、5%CO₂培养箱中培养过夜;第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代:贴壁细胞,弃去培养上清,PBS清洗1-2次,加入1ml 0.25%Trypsin-EDTA消化3-5分钟(37℃),细胞变圆脱落后加3ml完全培养基终止消化,吹打均匀,1000rpm离心5分钟,弃上清,用新鲜培养基重悬,按1:3比例分瓶;悬浮细胞,收集细胞悬液,1000rpm离心5分钟,弃上清,加1-2ml培养液吹匀,按1:2到1:5比例分装。
细胞冻存:细胞生长良好时,弃培养基,PBS清洗后加入1ml胰酶消化(细胞变圆脱落),加入2ml完全培养基终止消化,血球计数板计数,1000rpm离心5分钟,用血清重悬细胞,加DMSO至终浓度10%,混匀后1ml/管分装至冻存管,程序降温盒中-80℃冰箱存放≥2小时后转入液氮灌储存。
注意事项
收到细胞后需检查包装及培养瓶是否完好,用75%酒精消毒表面,显微镜观察细胞状态;静置2-4小时后培养。
培养过程中可出现部分细胞漂浮,属正常现象,可离心富集后传代使用。
运输用灌液培养基不可继续培养,需更换新鲜完全培养基;首次传代建议1:3传代。
操作全程需严格无菌,定期检测支原体、细菌、真菌污染。

培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
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功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运;以ATP为核心载体,通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能;通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导;原核细胞采用二分裂,真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖;细胞可进行程序性死亡(凋亡),并在多细胞生物中实现分化形成不同组织
关键字: NCI-H345[H345];贴壁细胞;
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