NCI-H747细胞
产品信息:

NCI-H747是一种人盲肠癌细胞系,贴壁生长,上皮细胞样形态,推荐使用RPMI-1640培养基加10%胎牛血清,在37℃、5%CO₂条件下培养。
产品名称 | NCI-H747细胞 | 英文名称 | NCIH747:NCI-H747 |
货号 | AXB6548 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞特性
来源:69岁白人男性盲肠癌组织
形态:上皮细胞样,贴壁生长
应用:肠癌机制研究、药物筛选、毒性测试
培养操作
复苏
冻存管37℃水浴快速解冻,加4-6mL预热完全培养基混匀
1000RPM离心3-5min,弃上清后用新鲜培养基重悬
接种至T25培养瓶,37℃培养箱过夜,次日换液并检查细胞密度
传代(细胞密度达80%-90%时进行)
贴壁细胞:弃培养基,PBS润洗1-2次,加1-2mL胰酶消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)37℃消化1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆并脱落时终止消化,离心(1000RPM,4-10分钟),弃上清后用新鲜培养基重悬,按1:2至1:5比例分瓶
悬浮细胞:直接离心收集细胞,用新鲜培养基重悬后分瓶,或采用半换液法
冻存
生长状态良好时,胰酶消化收集细胞,离心后弃上清
用冻存液(90%FBS+10%DMSO或无血清冻存液)重悬,细胞密度不低于1×10⁶/mL
分装至冻存管,程序降温后-80℃冰箱或液氮罐长期保存
注意事项
收到细胞后立即检查是否有污染,用75%酒精消毒瓶身,显微镜下观察细胞状态
运输用的培养基不可重复使用,需更换新鲜配制的完全培养基
首次传代建议1:2比例,后续根据细胞生长速度调整传代比例
定期检测支原体污染,建议进行STR鉴定确保细胞身份

基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
公司正在出售的产品:
单抗 单抗Multi-class antibodies规格: | Rhesus antibody Rh Hyaluronidase-PH20/Haase 透明质酸酶/玻璃酸酶抗体 规格 0.1ml |
Mitoferrin 1 英文名称: 线粒体铁转运蛋白1抗体 0.2ml | IL-7 英文名称: 白介素7抗体 0.1ml |
Anti-phospho-P53 (Thr18) /FITC 荧光素标记0酸化抑制基因P53抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | AQP-4 ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4 |
TM(Human Thrombin) ELISA Kit 人凝血酶Multi-class antibodies规格: 48T | CLN3 英文名称: 神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体 0.2ml |
Anti-TRPM2 瞬时受体电位离子通道蛋白抗体(M亚家族)Multi-class antibodies规格: 0.2ml | phospho-RPS6KB1(Thr 412) 英文名称: 0酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 0.1ml |
phospho-CK18(Ser52) 英文名称: 0酸化细胞角蛋白18抗体 0.1ml | Anti-TRPM2 瞬时受体电位离子通道蛋白抗体(M亚家族)Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
DAD1 英文名称: 细胞死亡蛋白1抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh CKLFH4/CMTM4 趋化素样因子超家族成员4抗体 规格 0.2ml |
Anti-PDGF-A/FITC 荧光素标记血小板源性生长因子-A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | CD80/B7-1(human) 人刺激分子B7-1蛋白抗原 0.5mg |
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/Bio 生物素标记的羊抗IgG 规格 0.1ml | NCI-H747细胞HCV-IgM(Human Hepatitis C virus IgM) ELISA Kit 人IgMMulti-class antibodies规格: 48T |
Anti-FGF5 纤维母细胞生长因子5抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | CD19(frozen) 浓缩液 0.1ml 进口分装 |
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字: NCI-H747;贴壁细胞;
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