P3X63Ag8细胞
产品信息：
P3X63Ag8细胞是小鼠骨髓瘤细胞系，源自P3K细胞株（来源于浆细胞MOPC-21的组织培养株），具有悬浮生长特性，广泛用于杂交瘤技术中的融合配体及免疫球蛋白生成研究。以下是其详细培养操作及特性说明：
产品名称 | P3X63Ag8细胞 | 英文名称 | P3X63Ag8:P3X63Ag8 |
货号 | AXB6595 | 生长特性 | 贴壁生长 |
培养操作
复苏细胞：
干冰运输的冻存管需立即37℃水浴快速解冻（1分钟内），酒精消毒后转入无菌操作台。
将细胞悬液离心（1000rpm，5分钟），弃上清，用新鲜培养基重悬后接种至培养瓶，37℃、5% CO₂培养箱培养过夜，次日换液。
传代培养：
细胞密度达80%-90%时进行传代。
悬浮细胞：直接离心收集细胞（1000rpm，5-10分钟），弃上清，用培养基重悬后按1:2至1:5比例分瓶。
贴壁细胞：弃旧培养基，PBS清洗后加入胰酶消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆后终止消化，吹打成单细胞悬液后离心分装。
冻存细胞：
生长状态良好的细胞用胰酶消化后离心，弃上清，加入冻存液（如基础培养基+8%DMSO+20%FBS或无血清冻存液）调整细胞密度至1×10⁶～1×10⁷/ mL，分装至冻存管。
程序降温：4℃ 30分钟→-20℃ 30分钟→-80℃过夜，转入液氮长期保存。
培养注意事项
生长条件：
培养基：RPMI-1640或DMEM高糖培养基（含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素），气相为95%空气+5% CO₂，温度37℃。
密度控制：悬浮细胞维持1×10⁵～1×10⁶个/mL，贴壁细胞需定期观察汇合度（80%-90%时传代）。
污染防控：
操作需在二级生物安全柜进行，培养基中添加抗生素减少杆菌污染，定期检测支原体、真菌等。
黑胶虫（可能为血清沉淀或蛋白结晶）若无增殖趋势且不影响细胞生长可忽略；若出现小黑点增殖需立即处理。
运输与保存：
干冰运输需复苏后立即培养；常温运输的存活细胞静置6-12小时后操作。运输培养基不可重复使用，需更换新鲜培养基。
细胞特性
生物学特性：
生长特性：悬浮或半贴壁生长（淋巴母细胞样形态），倍增时间约16-26小时。
遗传特征：抗8-氮杂鸟嘌呤（0.1mM），但对HAT培养基敏感；为胆固醇营养缺陷型（缺失3-酮类固醇还原酶活性），能生成但不分泌免疫球蛋白。
质量控制：
污染检测：支原体、细菌、真菌、HIV-1、HBV、HCV等均为阴性；鼠痘病毒检测阴性。
纯度：细胞纯度高于90%（细胞角蛋白-18免疫荧光染色阳性）。
应用与安全：
仅限科研使用（生物安全等级1），可用于杂交瘤制备及单克隆抗体生产。
所有废液及接触器皿需高压灭菌后丢弃，操作时需防护（潜在生物危害性）。
基本操作步骤：
原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。
具体特点如下：
环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。
生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
公司正在出售的产品：
MGEA5 英文名称： 组蛋白乙酰转移酶抗体(脑膜瘤表达抗原5) 0.2ml | 25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羟基维生素D3Multi-class antibodies规格： 48T |
Rhesus antibody Rh ELL 聚合酶延伸因子抗体 规格 0.2ml | Rhesus antibody Rh FAF1 Fas相关1因子抗体 规格 0.1ml |
Hepsin 英文名称： 跨膜蛋白酶丝酸1抗体 0.2ml | Anti-E Tag E Tag标签抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
phospho-alpha B Crystallin (Ser45) 英文名称： 0酸化α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体 0.1ml | AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin) α-1抗胰糜蛋白酶 10mg |
NPDC1 英文名称： 神经调控蛋白1抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh Dynamitin/DCTN2 动力蛋白激活蛋白2抗体 规格 0.2ml |
Beta-CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 小鼠激素β | NPDC1 英文名称： 神经调控蛋白1抗体 0.2ml |
25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羟基维生素D3 | TIMP-4(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4) 金属蛋白酶组织抑制因子-4(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg |
Ezrin 英文名称： 埃兹蛋白抗体 0.1ml | Anti-CDK2 周期素依赖性激酶2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml |
PT(Human Prothrombin0 ELISA Kit 人凝血酶原Multi-class antibodies规格： 48T | P3X63Ag8细胞Rhesus antibody Rh RNF70 环指蛋白70抗体 规格 0.2ml |
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神经毒素(35肽)Multi-class antibodies规格： 0.1mg | Anti-BSEP 胆汁酸盐输出泵蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml |
注意事项与应用：
无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。
抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字： P3X63Ag8;贴壁细胞;
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