Raw2647,C17细胞
产品信息:

Raw264.7细胞是一种源自BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系,被广泛用作免疫学和炎症研究的“万能工具”;而“C17细胞”在提供的搜索结果中未被提及,无法提供相关信息。
以下是关于Raw264.7细胞的详细说明、培养特性及操作方法的综合整理:
Raw264.7细胞详细说明与特性
产品名称 | Raw2647,C17细胞 | 英文名称 | Raw2647C17:Raw2647, C17 |
货号 | AXB6623 | 生长特性 | 贴壁生长 |
起源与基本属性
来源:该细胞系于1970年代从BALB/c小鼠的腹腔巨噬细胞中分离,并经Abelson鼠白血病病毒(MuLV)诱导永生化而来。
分类:属于小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,雄性,成年来源。
生长特性:为半贴壁细胞,贴壁性相比一般贴壁细胞会差一些,培养过程中会同时出现贴壁和悬浮的细胞。
培养条件:在37℃、5% CO₂(95%空气)的饱和湿度环境中培养,基础培养基通常为DMEM高糖培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%双抗(P/S)。
形态特征与功能
正常形态:细胞正常生长时主要呈圆形或椭圆形,小而透亮,贴壁牢固。部分资料也描述其为不规则圆形或可呈现纺锤形。
分化特性:该细胞很容易发生分化。当细胞状态不佳时,会变为梭形、长梭形或多角形,并可能伸出伪足。分化细胞贴壁更牢固,而未分化细胞贴壁较松散。培养环境恶劣、吞噬过多抗原、血清质量差、吹打过猛或传代间隔过长均可能诱导分化。
功能特性:保留了巨噬细胞的核心功能,包括吞噬能力(如吞噬乳胶颗粒、酵母聚糖)和免疫反应。可被脂多糖(LPS)等刺激物激活,分泌炎症因子(如TNF-α、IL-6),因此常用于炎症模型和药物筛选。此外,该细胞可用于研究破骨细胞分化、肿瘤微环境及病原体感染机制。
Raw264.7细胞培养操作指南
复苏
将冻存管从液氮中取出,立即放入37℃水浴中快速摇晃,直至仅剩米粒大小冰块(融化过程不超过2分钟)。
将细胞悬液转移至含4-6 mL预热完全培养基的离心管中混匀。
900-1000 rpm离心3-5分钟,弃上清,用新鲜培养基重悬细胞。
接种至培养瓶中,在37℃、5% CO₂培养箱中培养,第二天观察细胞状态。
传代
当细胞密度达到70%-90%时进行传代。建议每天观察,避免过度生长。
避免使用胰酶:该细胞对胰蛋白酶敏感,接触后会迅速自发分化,导致贴壁变紧难以消化。因此,不推荐使用胰酶进行常规传代。
推荐方法:轻轻吸去旧培养基,保留2-3mL培养基。用无菌细胞刮刀或移液枪头轻柔吹打细胞表面,使细胞脱落。
将细胞悬液收集至离心管中,900-1000 rpm离心3-5分钟,弃上清。
用新鲜完全培养基轻柔重悬细胞,按1:2至1:4的比例(或根据细胞密度调整为1:3至1:6)分装到新的培养瓶中,补足培养基继续培养。
注意事项:吹打过程需轻柔,避免机械刺激造成细胞自分化或损伤。
冻存
用细胞刮刀或吹打法收集细胞,1000 rpm离心5分钟,弃上清。
用预冷的冻存液(如90% FBS + 10% DMSO 或 DMEM高糖 + 10% FBS + 10% DMSO)重悬细胞,密度建议为1×10⁶~5×10⁶ cells/mL。
将细胞悬液分装至冻存管(1 mL/管),在4℃平衡15-30分钟。
将冻存管放入程序性冻存盒(-1℃/min降温),然后置于-80℃冰箱过夜,最后转入液氮罐中长期保存。
收货处理
常温细胞(T25瓶):用75%酒精消毒瓶身,放入培养箱静置4小时以上。若细胞密度大于80%,可按1:2比例传代;若低于70%,可继续培养至合适密度。若发现较多悬浮细胞,应离心收集并放回原瓶。
冻存细胞:尽快检查干冰是否充足,若干冰充足可将细胞置于-80℃冰箱(2-3天内复苏);若干冰完全挥发,建议立即复苏并联系供应商。

细胞类型与特性:

原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-50代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
特殊细胞的生物特性举例:

成纤维细胞:具丰富粗面内质网、高尔基体,能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质;在外伤刺激下可恢复幼稚状态,参与组织修复。
肿瘤细胞:具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性,常用于药物筛选与癌变机制研究。
神经干细胞:具多向分化潜能(可分化为神经元、星形胶质细胞等),增殖能力强,在体外培养中可形成克隆球。
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
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