总巯基(-SH)测定试剂盒/微板法/48样
测定原理:
5 ,5 ’-二硫代双,2-硝基苯甲酸(DTNB)与巯基化合物反应时能产生一种黄色化合物,可进行比色定量测定。试剂的组成与配制:
试剂一:标准品粉剂,3 支,4℃密封保存 6 个月。
10mmol/L 标准品贮备液的配制: 每次测定前将 1 支标准品粉剂加 1ml 试剂三缓冲液溶解, 即为10mmol/L 标准品贮备液,4℃密封保存。
500 μmol/L 的标准应用液的配制:10mmol/L 标准品∶试剂三缓冲液=1 ∶ 19 即 20 倍稀释配成应用液,按所需量现用现配。
试剂二:透明剂,2ml ×1 瓶,4℃密封保存 12 个月(天冷时会凝固,每次测试前适当水浴加温以加速溶解,直至透明方可应用)。
试剂三:缓冲液,20ml ×1 瓶,4℃密封保存 6 个月。
试剂四:显色剂,3ml ×1 瓶,4℃避光保存 6 个月。
工作液一的配制:按透明剂∶缓冲液∶显色剂=1 ∶50 ∶25 的比例混合,用多少配多少。
工作液二的配制:按透明剂∶缓冲液=1 ∶75 的比例混合,用多少配多少。样本前处理:组织样本:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的生理盐水,冰浴条件下机械匀浆,制成 10%的组织匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。血清(浆)样本: 直接取样10μl操作表:
标准孔
空白孔
测定孔
对照孔
500 μmol/L 标准
10μl
试剂三
待测样本
工作液一
150μl
工作液二
轻轻摇动孔板,静置 5 分钟,405nm波长,用酶标仪测定各孔吸光度 OD 值(30分钟内完成比色)
上海酶联生物科技有限公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!