铁离子还原能力测定试剂盒分光法/48样
产品简介:
抗氧化物可以还原 Fe3+- 三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ, 随后在
590nm 测定蓝色的 Fe2+-TPTZ 即可获得样品中的铁离子还原能力,吸光值越高表示样品
的还原能力越强。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、恒温水浴锅、低温离心机、可调式移 液器、研钵、蒸馏水。
铁离子还原能力测定:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实
验样本和试剂浪费!
1、样本制备:
①组织样本:
称取0 . 1g 样本(若是干样可取0.02-0.05g), 加 入 1mL 的80%乙醇(自备)进行匀浆,
匀浆后转入2mL 离心管中;于60℃,200-300W 条件下超声提取30min ( 间 隔 5min
振荡混匀一次)。12000rpm, 离 心 1 0min, 取上清,置冰上待测。
②液体样本:水溶性样本可直接检测。若是油性样本,可用80%乙醇溶解后再取上清检测。
2、上机检测:
①可见分光光度计预热30min, 调节波长至590nm, 蒸馏水调零。
②显色液配置:将试剂一、试剂二、试剂三按10:1:1 的比例混合,使用前37℃预温,
现配现用,注意避光。
③不同样本抗氧化能力不一,可先选取2个样本做检测,若 A 测定超过2,需对样本
用80%乙醇稀释,稀释倍数 D 代入公式计算。
试剂盒组成和配制 :
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
试剂一 | 液体45mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂二 | 液体4.5mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂三 | 液体4.5mL×1瓶 | 4℃保存 |
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标准品 | 粉体mg×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲,则用到该试剂。 |
附 :标准曲线制作过程:
1. 制备标准品母液(100μmol/mL): 临用前加1mL 蒸馏水,充分溶解混匀。
2. 把母液用蒸馏水稀释成以下浓度梯度的标准品:0,0.8,1.6,2.4,3.2,4 μmol/mL。 也可
根据实际样本来调整标准品浓度。
3. 按照测定管加样体系操作,依据结果即可制作标准曲线。
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