吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)测定试剂盒/微量法/48样
测定意义:
脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯氨酸代谢因其初始底物不同,分为谷氨酸( Glu) 和鸟氨酸( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS , Δ 1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷氨酸为前体合成脯氨酸途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。
测定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成 P5C 过程中分解 ATP 生成 ADP 和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定 P5CS 活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水操作步骤:
定磷(在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂
空白管
标准管
对照管
测定管
0.5μmol/ml 标准磷应用液(μL)
20
上清液(μL)
蒸馏水(μL)
定磷试剂(μL)
200
注 意:
1、由于每一个样都必须做对照,本试剂盒 100 管保证测 48 份 P5CS 活性。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。
3、空白管和标准管只要做一管。每个测定管设一个对照管。
上海酶联生物科技有限公司
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