半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属
(如卷心菜,菜花,西兰花) ,以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase) 。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和 NH3 。CSL 是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定 CSL 活性对于研究食品安全具有重要意义。
测定原理:
CSL 催化 S-甲基-L-半胱氨酸亚砜反应产生丙酮酸,与 2,4-二硝基苯肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm 下有特征吸收峰。
自备仪器和用品:
天平、研钵、离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水测定操作:
对照管
测定管
样品(μL)
50
试剂一 (μL)
25
蒸馏水(μL)
试剂二(μL)
充分混匀,37℃反应20min
试剂三(μL)
100
试剂四(μL)
充分混匀,室温反应 5min
试剂五(μL)
250
充分混匀,静置 5min ,吸取 200μL 至 96 孔板,测定 510nm 处吸光值,记为 A 对照和 A 测定,△A=A 测定-A 对照。每个测定管设一个对照管。
注 意:
若测定结果中吸光值超过 1,请将样本稀释后进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。香菇类样本活性较大,可能需要稀释 80-100 倍。
上海酶联生物科技有限公司
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