果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
植物叶绿体中果糖 1,6-二磷酸醛缩酶是光合作用中参与 calvin 循环的重要酶。催化果糖 1,6-二磷酸和景天庚酮糖 1,7-二磷酸的合成反应,在各种逆境胁迫下表现不同的响应。
测定原理:
果糖 1,6-二磷酸醛缩酶催化果糖 1,6-二磷酸生成 3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮,在磷酸丙糖异构酶和 α-磷酸甘油脱氢酶作用下催化 NADH 和磷酸二羟丙酮生成 NAD 和α-磷酸甘油,340nm 处吸光值的变化可反映果糖 1,6-二磷酸醛缩酶活性的高低。
自备仪器和用品:
天平、震荡仪、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。
测定操作:
1. 紫外分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2. 取微量石英比色皿/96 孔板,依次加入 100 μ L 试剂一,20 μ L 试剂二,20 μ L 试剂三,20μL 试剂四, 20 μ L 试剂五,20 μ L 粗酶液,充分混匀,记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2,△ A=A1-A2。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
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