淀粉磷酸化酶(SP)测定试剂盒/微量法/96样 新品

淀粉磷酸化酶(SP)测定试剂盒/微量法/96样

测定意义：

淀粉磷酸化酶（Starch Phosphorylase ，SP）是淀粉代谢过程唯一的可逆反应酶，既可催化淀粉的合成，也可催化淀粉的分解。在高等植物中，淀粉磷酸化酶（合成方向）主要存在于质体中，负责延长淀粉的 α-1,4-葡萄糖链的非还原末端；淀粉磷酸化酶（分解方向）主要存在于细胞质基质中，催化淀粉中的 α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸，负责葡萄糖链的磷酸解，是淀粉代谢过程中的关键酶。在植物体中，淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级，一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解，因此，分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。

测定原理：

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的 α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸，葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸，并在 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原 NADP+产生 NADPH，使 340nm下吸光值增加。

自备仪器和用品：

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96  孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

1 、酶标仪预热 30min   以上，调节波长至 340nm；

2 、工作液的配制：临用前按照样本量将试剂一、试剂二、试剂三按照 170 μL:10 μL:10 μL   的

比例混合，临用前配制，半小时内使用。

3 、在 96  孔板中加入 10 μL  样本和 190 μL   工作液，立即混匀，记录 340nm   处 1min   时的吸光值 A1  和 6min   时的吸光值 A2，计算 ΔA=A2-A1。

注 意：

正式测定前务必取 2-3  个预期差异较大的样本做预测定。