果糖激酶(FRK)测定试剂盒/分光光度法/48样 新品

果糖激酶(FRK)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

蔗糖是大多数高等植物从源到库运输的主要形式,  但进入库器官后被分解为果糖和葡萄糖,果糖在进入下一步代谢前必须由果糖激酶或己糖激酶进行磷酸化，以帮助库组织的建立和库强的提高，而果糖激酶是催化果糖磷酸化的主要酶。此外，果糖激酶还可以作为植物的己糖感受器和信号分子，通过影响植物的生长周期来调控植物的代谢和生长发育进程，果糖激酶在库组织中发挥重要的作用。因此，研究果糖激酶对研究植物中果糖代谢调节机制具有十分重要的意义。

测定原理：

FRK  催化果糖合成 6-磷酸果糖，6-磷酸果糖在磷酸己糖异构酶的作用下异构为 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化 6-磷酸葡萄糖脱氢生成 NADH ，NADH  在 340nm  有特征吸收峰。

自备仪器和用品：

分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL  石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

1 、 分光光度计预热 30min   以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2 、 配好的试剂于 25℃预热 10min。

3 、 样本测定

在 1mL  石英比色皿中依次加入加入 250 μ L  样本、500 μ L   试剂二，125 μ L  试剂三，125 μ L  试剂四，混匀，立即记录 340nm  处 30s   时的吸光值 A1  和 5min30s  后的吸光值 A2，计算Δ A=A2-A1。

注 意：

若 ΔA  大于 0.5，需将酶液用提取液稀释，计算公式中乘以相应稀释倍数。或将反应时间缩短至 2min，使 A2-A1  小于 0.5，可提高检测灵敏度。