6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH)/醛糖6-磷酸还原酶(A6PR)紫外法/48样
产品简介:
6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH,EC 1.1.1.200)又称醛糖 6-磷酸还原酶(Aldose-6-phos-phate reductase,A6PR),催化 D-山梨糖醇 6-磷酸和 D-葡萄糖 6-磷酸之间的相互转化。研究发现该酶在苹果叶片等蔷薇科植物中广泛分布,其在山梨醇合成中起着重要作用。6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH)催化 D-葡萄糖 6-磷酸还原,并使还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化。因此,通过检测 340nm 下 NADPH 的下降速率,即可得出 S6PDH 的酶活性大小。该酶催化的反应:D-sorbitol 6-phosphate+NADP+=D-glucose 6-phosphate+NADPH+H+。试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体60mL×1瓶
4℃保存
试剂一
粉剂mg×2支
用前甩几下或离心使粉剂落入底部,每支分别加0.6mL蒸馏水溶解备用。用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融,三天内用完。
试剂二
液体40mL×1瓶
试剂三
粉剂mg×1支
临用前甩几下使粉剂落入底部,再加1.1mL蒸馏水溶解备用。
所需的仪器和用品:紫外分光光度计、1mL 石英比色皿(光径1cm)、 台式离心机、水浴锅、可调式移液器、 研钵、冰。6-磷酸山梨醇脱氢酶(S6PDH)活性检测:建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!样本制备:①组织样本:
称取约0 . 1g 组织样本,加入1mL 提取液,冰浴匀浆,12000rpm,4℃ 离 心 1 0min,取上清,置冰上待测。
[注]: 若增加样本量,可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL)为1:5~10的比例进行提取。
上海酶联生物科技有限公司
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