乙酰酯酶(AE)活性测定试剂盒分光法/24样
产品简介:
乙酰酯酶 (EC 3.1.1.6,AE) 已被证明是消除饲料细胞壁中阿魏酸等酚酸类木质素的关键酶。可与其他细胞壁降解酶协同作用共同促进饲料等细胞壁的降解。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体30mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂一 | 液体30mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂二 | 粉剂×2支 | 4℃保存 | 临用前每支加0.7mL无水乙醇混匀溶解,仍4℃保存。 |
试剂三 | 液体5mL×1瓶 | 4℃保存 |
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标准品 | 粉体×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲,则用到该试剂。 |
所需的仪器和用品:
分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、 可调试移液器、台式离心机、水浴锅、 研钵、冰。
乙酰酯酶(AE)活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
①组织样本:
取约0 . 1g 组织(水分充足的样本可取0.5g), 加 入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,4℃× 12000rpm 离 心 1 5min, 取上清液待测。
[注]: 若增加样本量,可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL)为1:5~10的比例提取。
②细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清取约500万细菌或细胞加入1mL 提取液, 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W, 超 声 3s, 间隔10s, 重复30次);12000rpm 4℃离心10min, 取上清,置冰上待测。
[注]: 若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液 (mL) 为 5 0 0 ~ 1 0 0 0 : 1 的比例进行提取。
③液体样本:可直接测定,或者适当稀释后测定。若浑浊,离心后取上清检测。
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