土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX 一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
测定原理:
ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 ACX 活力。
自备仪器和用品:
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。 操作表:
对照管
测定管
土样(g)
0.02
缓冲液(μL)
150
100
试剂一 (μL)
50
混匀,50℃震荡反应 30min ,立即 90℃水浴 10min ,8000g ,25℃离心 10min ,取上清 100μL
试剂二(μL)
混匀,90℃水浴中显色5min ,取 180μL 于微量石英比色皿/96 孔板测定 540nm 处吸光值 A ,分别记为 A 对照管、A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。
注 意:
1. 保证震荡反应 30min,使酶与底物充分接触。
2. 注意 90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
上海酶联生物科技有限公司
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