人稳定表达RspoI蛋白的293T细胞;HA-R-Spondin1-FcHEK-293Tcells
产品信息:

人稳定表达RspoI蛋白的293T细胞(产品名:HA-R-Spondin1-FcHEK-293Tcells)是一种经基因工程改造的HEK-293T细胞系,可稳定表达RspoI蛋白(R-Spondin 1),常用于分子生物学、蛋白表达及病毒包装等研究。
产品名称 | 人稳定表达RspoI蛋白的293T细胞;HA-R-Spondin1-FcHEK-293Tcells | 英文名称 | HA-R-Spondin1-FcHEK-293Tcells:HARSpondin1FcHEK293Tcells |
货号 | AXB10216 | 生长特性 | 贴壁生长 |
特性
细胞来源:基于HEK-293T细胞系,该细胞源自人胚胎肾细胞,通过稳定转染SV40大T抗原基因获得高转染效率和高效蛋白表达能力。
核心特点:
高转染效率:易于接受外源DNA,适用于瞬时蛋白表达和病毒载体生产。
贴壁生长:形态为上皮细胞样,但贴壁能力较弱,易在操作中脱落成团。
生物安全:生物安全等级为BSL-1,操作相对安全。
应用:广泛用于重组蛋白(如R-Spondin 1)的生产、信号通路研究及病毒包装(如慢病毒或逆转录病毒)。
培养操作
培养条件:
培养基:推荐使用DMEM培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素-链霉素(P/S),或根据供应商说明使用特定完全培养基。
环境:37℃、5% CO培养箱中培养,传代比例为1:3至1:6,每周换液2-3次。
关键操作步骤:
复苏细胞:
从液氮中取出冻存管,快速置于37℃水浴中解冻(避免结晶),用75%酒精擦拭管壁。
将细胞悬液转移至含5ml完全培养基的离心管,1000rpm离心5分钟,弃上清后重悬于新鲜培养基,接种至培养瓶(如T25瓶),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
传代培养:
当细胞密度达80%-90%时进行传代。
弃培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗1-2次。
加入1-2ml消化液(0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA),37℃消化1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落时,加入5ml以上含血清的完全培养基终止消化。
轻轻吹打成单细胞悬液,1000rpm离心8-10分钟,弃上清后重悬于1-2ml培养液,按1:2至1:5比例分至新培养瓶(每瓶补加5-6ml培养基)。
细胞冻存:
取生长状态良好的细胞,消化后离心收集,用冻存液(如95%培养基+5% DMSO)重悬,分装至冻存管。
程序降温:先置于-20℃ 1.5小时,移至-80℃过夜,24小时后转入液氮长期保存;或使用程序降温盒直接放入-80℃。
注意事项:
贴壁松散:操作时动作需轻柔,避免剧烈吹打导致细胞脱落;若细胞成团,可轻柔吹打分散,无需强行制成单细胞悬液。
培养基预热:换液时使用预热至37℃的培养基,防止温度冲击影响细胞状态。
质量监控:定期进行STR鉴定确保细胞身份,观察细胞密度用低倍镜(4X),形态观察用高倍镜(10X或20X)。
运输问题:运输中可能因贴壁不牢发生脱落,属正常现象;若脱落较多,可收集培养液离心后重悬沉淀进行传代。
细胞类型与特性:

原代细胞:直接从组织中分离的细胞,通常指第1-10代细胞,具有接近体内状态的特性。
细胞系:原代细胞首次传代成功后形成的细胞群,可连续传代。
细胞株:从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,通常为第10-50代。
根据生长方式分为:
贴壁细胞:需附着在培养瓶表面生长,如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞:在培养基中自由悬浮生长,如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞:兼具贴壁和悬浮生长特性。
特殊细胞的生物特性举例:

成纤维细胞:具丰富粗面内质网、高尔基体,能合成胶原纤维、弹性纤维及有机基质;在外伤刺激下可恢复幼稚状态,参与组织修复。
肿瘤细胞:具无限增殖、贴壁依赖或悬浮生长、易转化等特性,常用于药物筛选与癌变机制研究。
神经干细胞:具多向分化潜能(可分化为神经元、星形胶质细胞等),增殖能力强,在体外培养中可形成克隆球。
公司正在出售的产品:
phospho-c-Raf(Ser339) 英文名称: 0酸化原癌基因c-Raf抗体 0.1ml | Anti-H1N1/FITC 荧光素标记A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
SRP(Human signal recognization particle antibody) ELISA Kit 人抗信号识别颗粒抗体Multi-class antibodies规格: 48T | Anti-5-HTR3/FITC 荧光素标记5-羟色胺受体3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 荧光素标记芳香烃受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-ED-1/FITC 荧光素标记外胚层抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
CD97 Kit Human 人 CD97 ELISA配对抗体 ELISA | Anti-E.coli DH-5 Alpha /HRP 辣根过氧化物酶标记抗DH5α大肠杆菌菌体蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
5T4 英文名称: 滋养层细胞糖蛋白5T4抗体 0.2ml | Anti-COX7A2/FITC 荧光素标记细胞色素c氧化酶COX7A2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh FAM82A1/RMD2 微管动力调节蛋白2抗体 规格 0.2ml | Anti-HBA1/FITC 荧光素标记人类血红蛋白α1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Anti-Tetracycline 四环素抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | 5 lipoxygenase 英文名称: 5-脂氧合酶抗体 0.1ml |
Anti-SAMDC/AMD1/FITC 荧光素标记S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | C10orf47 英文名称: 10号染色体开放阅读框47抗体 0.2ml |
Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 鱼类状腺原酸 | 人稳定表达RspoI蛋白的293T细胞;HA-R-Spondin1-FcHEK-293TcellsBacillus anthraci 炭疽杆菌菌体蛋白 0.5mg |
Anti-phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 0酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | Rhesus antibody Rh PAP2c/AP2-gamma 0脂酸0酸酶2C抗体 规格 0.1ml |
注意事项与应用:
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
关键字: HA-R-Spondin1-FcHEK-;人稳定表达RspoI蛋白的293T细胞;贴壁细胞;
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