人脐动脉平滑肌细胞永生化;HUASMC-SV40T
产品信息:

人脐动脉平滑肌细胞永生化(HUASMC-SV40T)是通过SV40大T抗原技术实现永生化的血管平滑肌细胞系,保留了血管平滑肌细胞的基本生物学特征,同时获得了无限增殖的能力,常用于血管生物学、动脉粥样硬化及血管重构等研究。以下是关于HUASMC-SV40T细胞的详细说明、培养操作和特性:
产品名称 | 人脐动脉平滑肌细胞永生化;HUASMC-SV40T | 英文名称 | HUASMC-SV40T:HUASMCSV40T |
货号 | AXB10373 | 生长特性 | 贴壁生长 |
1. 细胞特性
来源:人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)通过SV40大T抗原转染技术实现永生化
永生化特性:SV40大T抗原可抑制p53和Rb等抑癌基因的功能,使细胞 bypass 细胞周期检查点,获得无限增殖能力。
功能特性:保留血管平滑肌细胞的基本功能特性,如收缩相关蛋白的表达(如α-SMA),但可能因永生化而部分丧失原代细胞的分化表型11。
2. 培养操作
2.1. 培养基
基础培养基:推荐使用MEM(Minimum Essential Medium)或DMEM培养基。
添加剂:添加10%胎牛血清(FBS)、1%青霉素-链霉素(P/S)溶液,可根据需要补充其他生长因子。
2.2. 培养条件
温度:37°C。
气体环境:95%空气 + 5% CO。
湿度:饱和湿度。
2.3. 传代步骤
观察细胞密度:当细胞密度达到70%-80%时进行传代,避免过度汇合影响细胞状态。
去除旧培养基:轻轻吸去培养瓶中的旧培养基。
清洗细胞:用预热的PBS轻轻清洗细胞1-2次。
消化细胞:加入适量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,置于37°C培养箱中消化1-2分钟,显微镜下观察细胞消化情况。
终止消化:加入适量含血清的新培养基终止消化,轻轻吹打使细胞脱落并均匀悬浮。
分装细胞:将细胞悬液按1:2至1:4的比例分装到新的培养瓶中,加入新鲜培养基。
继续培养:将培养瓶放回培养箱中继续培养。
2.4. 冻存与复苏
冻存:使用含有90%胎牛血清和10%DMSO的冻存液,将细胞悬液分装到冻存管中,按照标准冻存程序逐步降温后存放在液氮罐中。
复苏:从液氮中取出冻存管,迅速放入37°C水浴中摇晃解冻,然后将细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中,离心后弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,接种到培养瓶中继续培养。
3. 注意事项
细胞状态监控:定期观察细胞形态和生长状态,确保无污染,并根据实验需求调整传代比例和培养条件。
用途限制:该细胞系仅供科研使用,不得用于临床或动物实验。
培养操作要点:

细胞培养
是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件),使细胞生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的技术。
根据细胞种类和生长方式,培养操作和特性各有不同。
基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
具体特点如下::
环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
公司正在出售的产品:
Anti-PAX3/FITC 荧光素标记配对盒基因3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SASS6 纺锤体组装异常蛋白6抗体 规格 0.2ml |
Anti-Profilin 1 前纤维蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-CD56/NCAM1 神经细胞粘附分子1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
Anti-ox-LDL/FITC 荧光素标记抗氧化抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | P51A 英文名称: 抑制基因p63α抗体 0.1ml |
Rhesus antibody Rh PBOV1 癌和癌高表达蛋白抗体 规格 0.2ml | Anti-KLK14/FITC 荧光素标记激肽释放酶14抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
TAP ELISA Kit 大鼠胰蛋白酶原激活肽Multi-class antibodies规格: 48T | ISR- Beta ELISA Kit 大鼠胰岛素受体βMulti-class antibodies规格: 48T |
Anti-phospho-STAT3(pThr705)/FITC 荧光素标记抗0酸化信号转导和转录激活因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Anti-PTP/PTPase/CD148 蛋白酪氨酸0酸酶CD148抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
Collagen V (Anti--Collagen Type V ) Ⅴ型胶原(多肽)Multi-class antibodies规格: 0.5mg | Anti-ATF2/FITC 荧光素标记活化复制因子2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
ADAM15 Kit Human 人 ADAM15 ELISA配对抗体 ELISA | Anti-MIF /FITC 荧光素标记巨噬细胞移动抑制因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Cripto-1(NT) 衍化生长因子抗体(N端) 规格 0.2ml | 人脐动脉平滑肌细胞永生化;HUASMC-SV40TAnti-PEG3 PEG3蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
RAB9 英文名称: ras癌基因家族Rab9蛋白抗体 0.1ml | Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1175) 0酸化内皮生长因子受体2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
关键字: HUASMC-SV40T;人脐动脉平滑肌细胞永生化;贴壁细胞;
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