对虾肝胰腺细小病毒（HPV）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
试剂简介：
对虾肝胰腺细小病毒（HPV）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）是一种基于实时荧光定量PCR技术的诊断工具，用于检测对虾中的HPV病毒核酸。
产品名称 | 对虾肝胰腺细小病毒（HPV）检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1448 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
技术原理与核心参数
该试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对HPV病毒基因组设计特异性引物和荧光探针，通过体外扩增检测病毒核酸
产品特点
高灵敏度：可检测低至10^2 - 10^3 copies/μl的病毒核酸。
高特异性：引物和探针针对HPV病毒保守区设计，避免交叉反应。
快速高效：整个检测过程约2-3小时，适合快速诊断
定量能力：可进行绝对定量和相对定量分析。
防污染设计：封闭反应体系减少污染风险。
操作流程
实验分区要求
试剂准备区
样本处理区
PCR扩增区
具体操作步骤
试剂准备：
从-20℃取出试剂盒，融化并混匀组分。
计算反应数（n）：n = 阴性对照数（1T） + 阳性对照数（1T） + 误差预留量（1T） + 样本数。
配制预混液：按比例混合PCR反应液、引物和探针，分装至PCR反应管（20μL/管）。
样本处理：
提取DNA：使用DNA提取试剂盒处理对虾组织样本（肝胰腺、鳃等），操作需在0-4℃进行以避免核酸降解。
设置对照：包括阳性对照（试剂盒提供，无传染性DNA片段）和阴性对照（无菌水）。
加样与扩增：
加样：在PCR反应管中加入处理好的样本DNA或对照品（5μL/管），终体积25μL。
PCR程序：UNG处理（37℃, 2分钟）、预变性（95℃, 3分钟），然后40个循环（95℃, 5秒；55℃, 40秒），FAM通道采集荧光信号。
结果分析：
通过Ct值（循环阈值）计算病毒载量，利用标准曲线进行定量。
特异性由引物-探针结合保证，灵敏度高。
试剂组成与仪器
主要成分（48测试）
PCR反应液：含缓冲液、dNTPs、Mg^2+等
特异性引物：针对HPV病毒基因组设计
荧光探针：标记荧光报告基团和淬灭基团
酶混合物：含Taq DNA聚合酶等
阳性对照：含HPV病毒DNA片段
阴性对照：无菌水或不含模板的反应液
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